整合子与不同来沙门菌株耐药性的相关性研究.pdfVIP

中文摘要 整合子与不同来源沙门菌株耐药性的相关性研究 摘 要 目的通过比较不同来源沙门菌株的耐药性差异、耐药 酶携带情况、I类整合子携带率和整合子上耐药基因携带情 况，分析其相互之间的关系，探讨整合子在细菌耐药性的获 得和传递中的作用，为预防和控制食源性疾病，指导临床合 理用药，制定干预细菌多重耐药性的产生及播散措施提供一 定的理论依据和实验基础。 方法 1．沙门菌株的收集与鉴定 共收集了133株不同来源的沙门菌：健康从业人员肠道 内分离菌株(健康携带株)111株：其中2005年为45株， 2007年为66株；食品中毒标本中分离菌株(食品株)8株； 临床标本分离菌株(感染株)14株。对收集到的菌株首先依 血清学实验鉴定，再使用肠杆菌鉴定系统API20E进行复核 鉴定，确保全部菌株均为沙门菌。 2．不同来源的沙门菌株的耐药性及耐药酶的检测 类共15种抗菌药物的敏感性测定；对耐3代头孢菌素的菌 株，采用双纸片协同试验检测了ESBLs携带情况，采用抗菌 药物及抑制剂组合耐药表型筛选法检测了AmpC酶的携带情 况。 3．不同来源的沙门菌株的I类整合子检测 中文摘要 采用PCR方法，对收集的菌株进行了I类整合子筛选。 在确认了I类整合子阳性菌株的基础上，对其整合的耐药基 因盒进行扩增，扩增产物纯化后进行测序，序列分析后对耐 药基因盒的种类及其结构进行分析。 结果 1．标本的生物学特性：133株实验菌株的氧化酶均为阴 性；A．F多价O抗原血清凝集全部为阳性；血清分型共得到 36个血清型，其中占前6位的为：德尔卑沙门菌、山夫登 堡沙门菌、猪霍乱沙门菌、阿哥纳沙门菌、明斯特沙门菌 别占47．4％和36．1％。 2．药物敏感试验结果：健康携带株、食品株和感染株对 两种或两种以上抗菌药物的耐药率分别为9．91％、12．50％和 57．14％，对单一抗菌药物以链霉素耐药率最高，而对头孢菌 素类药物较为敏感。 2．1 11 1株健康携带株对两种或两种以上抗菌药物的耐 带株对四环素与链霉素耐药率最高，均为13．51％，但对链霉 素耐药中介率高达65．77％。 2．2 8株食品株对萘啶酸耐药率最高，为37．5％，其次 对四环素的耐药率为25％，对链霉素中介率达37．5％。 2．3 14株感染株对各种抗菌药物耐药率由高到低的顺 氨苄西林与甲氧苄氨嘧啶．磺胺甲基异恶唑(33．33％)，头孢 噻呋与氯霉素(26．67％)，头孢噻吩、头孢曲松钠、庆大霉 中文摘要 素、卡那霉素为(13．33％)。可见感染株耐药性较肠道株与 食品株明显增强。所有菌株对头孢西丁的耐药率为O；耐3 代头孢菌素的菌株对碳青酶烯类抗菌药物亚胺培南(IPM) 的耐药率均为O。 健康携带株、食品株和感染株的超广谱B．内酰胺酶携带率分 别为O、12．5％和7．1％；AmpC的携带率均为O。 4．整合子检测结果：健康携带株、食品株和感染株的整 药基因盒阳性率分别为5．41％、O和50％；基因盒的种类分 别是编码耐磺胺类药物甲氧氨苄嘧啶的基因盒dfrAl5、 耐链霉素一壮观霉素的基因盒aadA2和一个功能未知的基因 盒orfF。 4．1 111株健康携带株中有11株为I类整合子阳性，携 带率为9．91％，其中6株细菌整合子携带有耐药基因盒，除 外，其余5株仅检出一个基因盒aadA2。I类整合子阳性率 2007年(23．08％)高于2005年(6．67％)。 4．2食品株中的多耐株：耐13种抗菌药物的114号菌只 检测出I类整合子但未检测出耐药基因盒。 4．3 14株感染株中10株为I类整合子阳性株，其中7 的8株中有5株为I类整合子阳性株，占62．5％。整合子阳 性率和耐药基因盒的种类都较健康携带株与食品株更高、更 中文摘要 复杂。 结论 1．临床感染株的耐药性及整合子阳性率均高于食品株 和健康携带株；2007年分离的健康携带株耐药性与整合子阳 性率均高于2005年。表明沙门菌的耐药性在逐年增加，提 示了监测细菌耐药性的迫切性，以