硝普钠、nl;#39;ggt;-硝基-左旋精氨酸甲酯和ph对肉鸡胫骨生长板软骨细胞生长分化的影响.pdfVIP

高晨 硝普钠、犷一硝基一左旋精氨瞳甲酮和PH对内鸡胫骨生长板软骨细胞生长分化的影响幕阳农学院硕土硷文 摘要 表达的影响 选21日龄肉鸡生长板软骨细胞进行体外培养，在第二代软骨细胞培养液中加入 增殖速度受到抑制，生长明显慢于对照组，添加L—NAME后，细胞生长速度明显加快， 并且提前进入快速生长期。SNP使胶原含量略有下降，胶原酶活性上升，而L-NAME 含量普遍高于对照组，并且随L-NAME的浓度的增加而逐渐增加(PO．05)。 速度明显变慢；NO浓度下降，细胞明显表现出增殖加快，表明NO对软骨细胞的增 殖起重要的调控作用。bFGF也使生长板软骨细胞数量增殖速率加快，同时培养基质 中NO水平显著降低，表明bFGF的作用也是通过NO介导的。硝普钠使生长板软骨 细胞培养基质中胶原含量降低、胶原酶活性提高、糖醛酸含量降低；而L—NAME相 反，表明NO对生长板软骨细胞的代谢产生重要的影响。 试验二不同pH对肉鸡胫骨生长板软骨细胞增殖、代谢的影响 选21日龄肉鸡生长板软骨细胞进行体外培养，调整第二代软骨缅胞培养液中的 影响。试验结果表明：PH7．3组细胞长势最好，第3天进入增殖期，第5天开始进入 对数生长期；pH7．6组长势稍缓，第4天开始进入增殖期，细胞数量也比pH7。3的组 略少；pH7．0组长势缓慢，第4天才开始呈现增长势头，第5天进入增殖期。pH7．9 组(Po．05)，pH7．0组的糖醛酸含量低于其他组。 pH偏低或偏高均会抑制生长板软骨细胞的增殖。pH7．0组培养基质中的NO浓 度显著高于其他组，pH偏低有可能是通过NO介导抑制生长板软骨细胞增殖的。在 pH值7．0时，培养基质中的NO浓度升高、胶原、糖醛酸含量降低、胶原酶活性提 高；在pH值7．6时培养基质中的NO浓度降低、胶原、糖醛酸含量提高、胶原酶活 IIl 商晨 硝普钠．n硝基一左旋精氨酸甲酯和PH对内鸡腔骨生长扳软骨细胞生托分化的影响 莱阳积学兢硬士论文 性降低。表明培养基质中pH的变化对软骨细胞代谢的影响，NO可能起到重要的介 导作用。 试验三SNP与L-N／k／VIE对肉鸡胫骨生长板软骨代谢、生长及血液生纯指标的影响 离子、酸碱平衡，胫骨软骨发育不良发生率、软骨基质组分的影响，以及对NOS活 性的作用。结果表明：随L-NAME浓度的增加，TD发病率呈上升趋势。血液pH值与 阳性对照组相比有所上升，碱贮和碱超含量有所上升，说明L-NAME在一定程度上能 碱化血液。同时检测到血浆和胫骨中NO的浓度均显著降低(P0．05)，软骨基质内 胶原、糖醛酸含量上升、胶原酶活性下降。添加SNP后发现血浆和胫骨中N0的浓度 均显著提高，软骨基质内胶原、糖醛酸含量下降、胶原酶活性上升。阳性对照组TD 发生率上升，检测发现磷酸根离子浓度显著增高(PO．05)，氯离子变化不明显，血 液pH值下降，血液和软骨中NO浓度降低。TD病鸡和健康鸡各项指标的对比发现， TD病鸡生长板厚度增加，病鸡血液和胫骨中NO浓度、NOS的活性均显著低于正常 组(PO．05)，TD病鸡软骨基质中胶原、糖醛酸含量增加、胶原酶活性下降。 SNP和L-NAME改变了体内NO的浓度，影响到生长板软骨组织内胶原、糖醛酸 含量，胶原酶的活性。TD病鸡与健康鸡各项检测指标证明在发生TD时，NO含量减 少，进而导致软骨细胞大量增生，胶原．蛋白多糖含量上升，形成软骨团。 关键词：肉鸡；胫骨软骨发育不良；一氧化氮；硝普钠；No．硝基．左旋精氨酸甲酯： 胶原；糖醛酸 高晨 硝普钠、Ni硝基一左旋槽奢[酸甲酯和PH对肉鸡腔骨生长板软骨细胞生长分化的髟响 莱阳农学院硕士论文 Abstraet 1．TheinfluenceofdifferentconcentrationSNPandL-NAMEontibiaI Experiment cells metabolismand growthplatecartilagemultiplication NOSmRNA expression The cellsderivedfrom