肿瘤增敏药物的敏作用及机制研究—机体生物小分子物质与肿瘤对射线和抗癌药物耐受的相关性.pdfVIP

复旦大学攻读博士学位研究生毕业论义 中文摘要 恶性肿瘤严重威胁人类的健康，发病率呈急剧上升的趋势。西方国家，最主 要的是肺癌，占发生率的15％和死亡率的28％。其次是直肠癌，乳腺癌和前列 腺癌。在我国，大肠癌，肺癌，胃癌和乳腺癌等发病率较高。 ‘ 虽然新技术新方法不断涌现，并应用于临床治疗，但是手术切除，放射和化 学治疗仍然是肿瘤治疗的最基本手段，尤其是放射和化学治疗，越来越广泛的用 于肿瘤患者。每年有超过70％的肿瘤病人接受放射或化学治疗，然而，与几十年 前相比，肿瘤的治愈率并没有明显的提高。影响肿瘤放化疗疗效提高的一个重要 原因，是肿瘤细胞对射线或抗癌药物产生了耐受性。 为了提高肿瘤细胞对放射治疗的敏感性，上个世纪60年代英国的Adams教 授提出亲电子理论，开始放射增敏剂研究，很多的科学家投身到放射增敏剂的研 制中，半个世纪过去了，增敏药物作为抗癌药物的一个分支，研究范围早已超出 了最初提出的可以增强有机体对射线敏感性并用于肿瘤辅助治疗的概念，更多的 增敏药物是通过克服肿瘤细胞对放射或抗癌药物耐受性，提高对肿瘤细胞的杀伤 效果。 增敏药物是一个多学科的研究领域。从分子生物学探究肿瘤对射线和抗癌药 物产生酬受性的原因，并针对性的设计、筛选低毒高效的肿瘤增敏药物，是目前 研究的趋势；正是有了这些可以调控肿瘤细胞敏感性的化合物作为研究的“目 标”，才能对复杂的肿瘤生物学尤其是涉及影响其辐射及化学敏感性的生物学机 制进行有效的研究。 本实验以增敏药物丁胱亚磺酰亚胺(BSO)为基础，寻找肿瘤细胞中克服对 射线和抗癌药物产生．唰受性的靶分子；建立可用于临床监测肿瘤病人对射线和抗 癌药物产生耐受性的客观生化指标；进一步调控产生耐受性的基因，为临床应用 提供充分的理论和实验依据。同时对新的生物还原活性增敏化合物一丝裂霉素C 衍生物和AQ4N的增敏作用及其作用机制进行研究，为寻找高效、低毒、有l临 床应用前景的肿瘤增敏药物开创新的途径。 中文摘要 目 的 研究肿瘤细胞中生物小分子物质谷胱甘肽(GSH)以及乏氧(一氧化氮， NO)与射线和抗癌药物耐受的相关性；分析谷胱甘肽合成抑制剂一丁胱亚磺酰 亚胺用于克服高表达多药耐药蛋白(MRP)介导的多药耐药性的效果；评价以外 周血单核细胞中谷胱甘肽检测肿瘤病人辐射敏感性的可行性；研究新型肿瘤增敏 化合物一生物还原活性物丝裂霉素C衍生物和AQ4N的增敏作用及其作用机制， 为进一步开展肿瘤增敏药物的研究和临床应用提供理论和实验依据。 方法 1．GSH，NO与肿瘤细胞对射线和抗癌药物敏感性的相关性研究 1．1GSH与肿瘤细胞对射线和抗癌药物敏感性的相关性研究 1．1．1GSFI与肿瘤细胞放射敏感性的相关性研究 a．以SGC7901(人胃腺癌)细胞为研究对象，克隆形成法检测单纯照射组(Y．射线． u u 1．2，4，8Gy外照射)平|l药物+照射纲(照射前24h给予10g／m1．100g／ml，Img／ml 的BSO抑制GSH合成)的细胞存活情况(设空白对照绸)，计算细胞存活率，拟台存活曲 线，比较不同实验条件F肿瘤细胞中GSH含量的差异利各组细胞的Ic。。的变化，回归分析 GSH与肿瘤细胞放射敏感性的相关性。 b．以SCrC7901细胞为研究对象，细胞计数比较单纯照射组(Y一射线，l，2，4，8Gy) 和药物十照射组(照射前6小时给予1mg／ml的BSO)的细胞存活情况(设空白对照绢)，观 察存活细胞中GSH含量的时相变化；细胞计数比较照射后存活的细胞再次照射时细胞存活 率同细胞内GSH含量的相关性。 1．1．2GSIt与肿痛细胞化学敏感性的相关性研究 p u 抗癌药物合并lOg／m1．100g／ml，lm∥ml的BSO对细胞的生长抑制效应，比较不同实 验条什I、肿瘤细胞中GSH含鼙的筹异平¨各化疗约的Ic50的变化，同¨1分析谷胱甘肽与肿瘤