肿瘤特异性ct联合胸腺肽α1体内肿瘤杀伤效应的实验研究.pdfVIP

中文摘要 肿瘤特异性CTL联合胸腺肽Q1体内肿瘤杀伤效应 的实验研究 摘 要 目的：探讨胸腺肽al(thymosin1,Tal)对肿瘤特异性细胞 T 毒性T淋巴细胞(cytotoxic 性黑色素瘤体内杀伤效应的影响。 ． 方法：取小鼠脾脏分离制备单个核细胞，贴壁法分离DC， 加入重组鼠粒．巨细胞集落刺激因子(rmGM．CSn10ng／ml、 坏死因子．a 集DC，行流式细胞检测及电镜扫描观察其表型及形态变化。 反复冻融恶性黑色素瘤细胞株(B16)，取其上清液制备B16全 细胞抗原，将制备好的抗原负载培养第5天的DC并加入 TNF．a促进DC成熟。绒毛柱法分离提纯小鼠脾脏来源的T 小鼠皮下注射0．2ml制备黑色素瘤肿瘤模型。在荷瘤第9天， 将小鼠随机分为3组，每组12只，分别为：①A组(生理盐 回输组)。治疗给予方式为：通过鼠尾静脉回输CTL，瘤周多 点皮下注射Tal。在荷瘤第9天各组即给予第1次治疗，此 Ta u 1(400g／kg)每3天皮下注射一次，每次0．2ml，共6次。 A、B、C每组又随机分为2个亚组，每个亚组6只小鼠。亚 中文摘要 组I：用于观察肿瘤生长及小鼠存活情况：1次／3天；根据公 绘制肿瘤生长曲线，同时观察小鼠死亡情况并计算生存率， 直至其中任一组小鼠死亡达50％时停止测量体积。亚组II： 用于测量瘤重和体积：荷瘤第21天颈椎脱臼法处死3个亚组 II中的全部小鼠，共计18只。取瘤称重，根据公式分别计算 瘤重和体积抑瘤率。并取肿瘤组织用于HE染色，观察治疗 后3组小鼠肿瘤的病理形态变化并利用透射电镜检测治疗后 肿瘤细胞凋亡情况。 结果：在荷瘤第18天测得3组小鼠肿瘤的平均体积为A 组(CTL+Ta 好小鼠的肿瘤体积进一步缩小，其中一只小鼠至荷瘤第32天 时肿瘤基本消退并且至实验结束依然存活。通过观察不同时 间肿瘤体积变化曲线可发现C组曲线上升平缓，B组曲线在 经历初期的平缓上升后在荷瘤第18天上升趋势开始明显增 大。在荷瘤第21天时解剖亚组II的小鼠根据各组肿瘤的平均 存情况：C组生存时间和生存率明显高于A、B两组。C组小 鼠的生存曲线下降平缓，A组小鼠至荷瘤32天时全部死亡， 中文摘要 B组和C组小鼠从荷瘤第9天至第45天保持83．3％的存活率， 但B组小鼠至荷瘤第55天时也全部死亡，而此时C组仍有 83．3％的小鼠存活。C组小鼠的中位生存期为60±3．67天，明 (3)治疗后的肿瘤组织经HE染色后光镜下可以发现B、C两组 肿瘤细胞浸润密度较A组减轻而出血、坏死增多，其中C组 则更为明显。 结论： (1)本实验将体外诱导出的肿瘤特异性CTL通过鼠尾静脉 成功地进行了回输治疗，这一模式的建立可以作为进一步研 究的基础。 提高其杀伤能力。． 射治疗小鼠恶性黑色素瘤的效果优于单独经鼠尾静脉回输肿 瘤特异性CTL。Tal在抑制肿瘤的生长，延长荷瘤小鼠生存 时间和提高生存率等方面有较高的价值。 (4)肿瘤免疫治疗配合免疫佐剂可有效提高肿瘤杀伤效 家 —‘Po 关键词：恶性黑色素瘤；胸腺肽al(Tal)；肿瘤特异性 CTLI过继细胞免疫治疗；肿瘤体内杀伤 英文摘要 An ontheEffectofTumor Experimental Study CTL Combinedwith l Specific Thymosinaagainst rn ● 17● lUmor