血小板蛋白酶活受体-1激活后下调结肠癌细胞mir-200b的表达.pdf

目 录 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………4 研究论文血小板蛋白酶活化受体．1激活后下调结肠癌细胞miR-200b的 表达 前言……………………………………………………………………8刚舌……………………………………………………………………芍 材料与方法……………………………………………………………9 结果……………………………………………………………………18 附图……………………………………………………………………20 附表……………………………………………………………………24 讨论……………………………………………………………………25 结论……………………………………………………………………29 参考文献………………………………………………………………29 综述 微小RNA和肿瘤的研究进展…………………………………34 致谢…………………………………………………………………………49 个人简历……………………………………………………………………50 中文摘要 IIllIIIlUIIJIlIJIIIII I IIl J 血小板蛋白酶活化受体．1激活后下调结肠癌笺旦跚j；18 表达 摘 要 目的3 结直肠癌是人类常见的恶性肿瘤之一，据全球癌症统计，其死亡率在 恶性肿瘤中排第四位。在我国，结直肠癌的发病率和死亡率呈逐年增高趋 势。转移是恶性肿瘤致死的主要原因。结直肠癌是一类上皮来源的恶性肿 transition，聊胛)是上皮来源肿瘤转移的首要步骤。 微小RNA是一类近十年来备受关注的广泛存在于真核生物及病毒中 的非编码小分子RNA，其大小约22个核苷酸。成熟的微小RNA通过与 靶mRNA的3’端非编码区完全或不完全互补结合，在转录后水平调控基 因的表达，调控细胞的多种生物学行为，与肿瘤的发生发展密切相关。而 ZEBl／2是其蕈要的靶基因。 临床上发现，晚期结直肠癌患者往往合并血小板增多症。早期研究发 1途径 现，血小板也能促进肿瘤转移。最新研究显示，血小板通过TGF—B 是人血小板表面的一种蛋白酶活化受体，血小板PARl激活后Q颗粒可能 释放大量细胞因子(如TGF．p1)影响肿瘤血管生成和转移。 血小板和miR-200家族均可通过TGF．B1途径影响肿瘤的转移。而它 们两者在调控肿瘤转移过程中是否存在关联在国内外罕有报道。本实验采 水平的影响，旨在为结直肠痛治疗提供新的依据。 方法： 1以不同浓度(1uM、3uM、5LlM、7uM、9 培养液)，在温箱中孵育24h后，采用MTT法枪测各组细胞，比较各 中文摘要 厶日翻可昂白{I萌霸}下h台匕6h爿畏，p jl且；m再啦■iZ巨哆a霸匕稿=JX‘rLo 2应用ELISA法对不同浓度(1 pM、3pM、5pM、7pM、9pM)PARl 血小板上清，设定4个处理组，分别取不同体积量(60 p1、120lal、240 对照组及单纯激动剂组，空白对照组单纯加细胞培养液，单纯激动剂 组加入0．72ttM 结果： 1 MTT结果显示，小剂量各个不同浓度(1 PARl激动剂处理组和对照组在492nm下测得的OD值分别为 低了32．9％(Po．01)。 2 ELI