血液介导的即刻性反应(ibmir)与异纲(罗非鱼小鼠)胰岛移植.pdfVIP

摘要 摘要 目的： 1．观察罗非鱼胰岛肝内移植对糖尿病小鼠的治疗作用。 2．观察罗非鱼胰岛肝内移植与血液介导的即刻炎症反应的关系。 3．观察炎性细胞及NK细胞在异纲移植免疫排斥中的作用。 4．探讨不同纲动物间胰岛细胞移植可行性及免疫排斥机理。 材料和方法： 1．以胶原酶消化法分离罗非鱼胰岛细胞，再采用手工物理分离法和低速 离心法纯化胰岛。 2．应用光学显微镜观察罗非鱼胰岛形态。采用台盼蓝染色法进行胰岛活 性的鉴定。 物性糖尿病模型。 4．随机把糖尿病小鼠分为两组，即实验组及对照组。对两组糖尿病小鼠 分别在肝脏内注射罗非鱼胰岛及生理盐水。于移植后1小时、12小时、24小时 和3天观察小鼠血糖的变化：并在移植后1小时、12小时及24小时分别处死1 只受体取鼠的肝脏标本。对移植物进行病理检查和免疫组化检测。 结果： 大于90％。 2．移植后受体的血糖检测：对照组糖尿病小鼠在移植后1h时血糖浓度为 移植组的血糖水平有明显的下降，浓度为(9．34士3．05)mmol／L，与作为对照组 相比有显著性差异(P0．05)。移植后12h时，实验组的血糖水平仍有继续的下 但在移植后24h时血糖浓度为(28．13-4-1．56)mmol／L，与对照组相比无显著性 摘要 差异(P0．05)。 3．组织学检测： 实验组：在移植后12h，病理检查可见移植物周围有轻度的炎症反应，有炎 症细胞的聚集，胰岛结构仍完整，但在各级血管处可见明显的凝血反应；在移 植后24h，小鼠血糖明显高于正常，肉眼观可见移植处有明显机化表现，病理 检查可见移植物周围有明显的炎症细胞浸润。免疫组化检查发现在移植物周围 有少量的NK细胞浸润。移植后3d，病理检查可见移植物周围可见大量的炎症 细胞浸润及纤维化表现。从NK-kb免疫组化定量分析发现在移植后24h时，移 组化检查结果中的阳性面积及OD值随着时间的推移有逐渐增加的趋势，这与 NK细胞的增加有关，但在移植后24h有减少的表现。对照组：在移植后1h和 24h，病理检查未发现移植部位周围有任何炎症细胞的聚集。 结论： 1．胶原酶消化法可作为常规分离罗非鱼胰岛的分离纯化方法。 2．将罗非鱼胰岛移植到糖尿病小鼠肝脏内，有助于降低糖尿病小鼠的血糖， 但效果短暂。 3．实验结果发现炎性细胞及NK细胞参与血液介导的即刻炎性反应。 关键词：胰岛移植 异纲 罗非鱼／d,鼠 Nl【细胞 Ⅱ ABSTRACr ABSTRACT objectives： 1．Observationoftheeffect isletsafter intothe diabetic ofTilapia transplantation mice． 2．Observationoftherelationbetweenislets andinstantblood-mediated Tilapiagraft inflammatoryresponse． function 3．Observationofthe ofNKcellsinfish-to-miceislet xenografrejection． ofthe ofthe betweentwodifferentClass 4．Approach possibilityxenotransplantation and mechanism． the蛔ection Methods： isletswere