实验性自身免疫脑脊髓炎大鼠血清中il-17和il-23的表达情况及依达拉奉的干预作用.pdf

中文摘要 L-1 实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠血清中I 7和 I L-23的表达情况及依达拉奉的干预作用 摘 要 目的： 多发性硬化(multiple nervous 统(central 的自身免疫性疾病。本病多在成年早期发病，女性多于男性， 大多数患者表现为反复发作的神经功能障碍。由于MS发病 率较高，呈慢性病程且青年人好发，因此成为重要的神经系 统疾病之一。目前MS的发病机制尚不完全清楚，而且缺乏 有效的防治措施，因此通过建立动物模型，探讨MS的发病 机制，寻求有效的治疗方案，是我们目前研究的主要方向。 MS的发病涉及遗传、病毒、免疫、环境地理等，是多 种因素共同致病的结果，其中免疫学因素在MS的发病中起 着关键性作用。以前我们认为MS的发生是由IL．12诱导的 Thl细胞所介导的，但是近几年随着与IL．23相关的且能够 分泌IL．17的Thl7细胞的发现和深入研究，人们发现介导这 轴，这为探索MS的发病机制提供了新的思路和方向。 种新型的小分子自由基清除剂，易透过血脑屏障，其主要通 过捕获羟自由基(·OH)抑制脂质过氧化作用、抑制脑细胞(血 管内皮细胞、神经细胞)过氧化作用，从而减轻脑水肿和脑组 织损伤，目前临床上主要用于缺血性脑血管病的治疗。近年 中文摘要 来有学者发现依达拉奉可以抑制活化的小神经胶质细胞的活 mRNA的表达， 性氧簇(ROS)和一氧化氮(NO)的产生及iNOS 并减轻小神经胶质细胞诱导的神经元死亡和树突毒性现象。 活化的小神经胶质细胞被认为与炎症性脱髓鞘疾病的发病机 理有关，因此提示依达拉奉对MS可能具有治疗价值。 本实验应用研究MS的动物模型一实验性自身免疫性脑 autoimmune 脊髓炎(experimental 型，使用依达拉奉注射液给予干预，通过对实验动物的发病 率，行为学改变，脊髓病理学变化以及血清中IL．17和IL．23 作用以及依达拉奉的治疗作用和机制，为临床实践提供理论 基础。 方法： (dexamethasone，DXM)组、依达拉奉小剂量组(3mg·kgidq)、 依达拉奉大剂量组(10 6天、23天三个亚组，每个亚组6只大鼠。 机分为7天、l 2模型制备：将新鲜豚鼠全脊髓制成匀浆，加上完全福 Freund’s 氏佐齐1](complete 的剂量为6mg／ml，经过乳化后按0．5ml／只分别于大鼠四肢足 垫和背部皮下注射。药物治疗组于模型制备第一天起给予相 应剂量的药物腹腔注射，药物每天一次持续给至动物处死时 为止。 3神经功能评分：于动物免疫诱导当日及免疫后每天对 动物的体重变化、精神状态、活动情况进行观察，并对动物 中文摘要 进行神经功能评分，采用Kono等提出的评分标准：1分： 动物尾部无力：2分：尾部无力+肢体无力；3分：肢体轻度 麻痹；4分：肢体严重麻痹，被动翻身后不能复原；5分： 濒死状态。 4血清中IL．17和IL．23的测定：将实验动物于免疫后 第7天、16天、23天时麻醉后心脏取血留取标本，室温静 置1小时，低温离心留取血清，．20℃冰箱冻存待用。应用酶 测定。 5组织病理学：在动物麻醉状态下，快速取其大脑侧脑 室周围及脊髓颈、胸、腰膨大处组织，4％多聚甲醛固定，石 蜡包埋，组织切片，HE染色，光学显微镜下观察炎症细胞 的浸润情况。 结果： 1动物发病率观察：依达拉奉大剂量组和DXM组大鼠 拉奉小剂量组与EAE组大鼠之间的发病率差异没有统计学 意义(pO．05)。 2行为学观察：各组大鼠在发病高峰期时神经功能评分 比较，依达拉奉大剂量组、DXM组各大鼠神经功能评分明 神经功能评分差异没有统计学意义(pO．05)。 3组织病理学观察：在疾病初期，EAE组大鼠组织