重组蛋白tmd-ⅲ、sp-10、aeg的免疫原性及其生殖作用.pdfVIP

三垦塑 ±奎塑至 !堡竺童旦 摘要 授精是配子问相互作用最后融合成合子的过程，是由配子各自表面蛋白分子互补介 导的，、特别是存在于精子顶体的蛋白，但从精子中提取量少，用分子生物学手段大量克 隆表达所需蛋白为受精机理的研究提供了方便．】本文用英国葛兰索公司重组构建表达的 三种抗原蛋白SP-IO。AEG，o舡)C．Ⅲ免疫大鼠，通过ELISA实验、免疫荧光组化客 验、交配实验对它们的免疫原性、在体内的生殖作用、精子表达部位进行了分析，结果 ∥7。一 如下： 1．三种克隆表达的精子蛋白tMI)c-m、SP-IO和AEG免疫动物可成功产生抗体， 并符合抗体产生的一般规律。ELISA试验和免疫荧光组化试验证明这三种重组蛋白较 好地保持了天然蛋白形式的免疫原性，可用于体内外实验进—步研究它们的具体作用 2．通过免疫大鼠交配实验研究精子蛋白tMDC-III、SP-10和AEG在体内的生殖 and 58．3％，AEG免疫组大鼠受精率显著降低．首次表明tMDC-III免疫大鼠虽然产生茼 滴度抗体．但受精率只有微弱下降。 3．通过检查免疫大鼠睾丸、附睾、F日巢、输卵管的组织形态，未见任何异常t说 明三种抗原免疫动物不是通过抑制精子发育和损伤生殖道而刚氐受精率的，同时说明了 它们对机体的安全性，可作为免疫疫苗开发的侯选者。 4．利用间接免疫荧光法对AF_,G、SP．10、tMDC-III蛋白在人、小鼠、兔子、猪、牛 精子上进行了精确定位，AEG、SP．10在顶体部均有表达，确证了它们与精卵融合有关； 首次对tMDC．1II蛋白在人、小鼠、兔子、猪、牛精子进行了精确定位，它主要存在于 人精子尾部主段，小鼠和牛精子顶体．猪精子顶体和颈部，兔精子头部、颈部和尾部的 主段及尾段。除人外，其它几种动物精子顶体均有tMDC-Ⅲ抗原的存在，暗示小鼠、 兔、猪和牛的tMDC．III可能在精卵融合中起作用。 SP．10 关键词AEG tMDC．IIt精子抗原受精 三墨塑 茎兰塑要 !咝生!旦 tMDC- oftheRecombinantProteins The andFertilization Immunogenicity Ⅲ、SP-10、AEG Abstraet two different Fertilizationisa which cells,sperm processby radically highlyprogrammed the is moleculeson and toforma It mli劬。d present by egg．unite z／got complementary inthe a∞m all gamet．L％．Especially《bcproteiussperm playimportmt SUlfltt∞of龇P删iVC can from of alittle be∞出acted