第一章 色谱学1.ppt

三、吸附色谱技术应用 2、薄层色谱法 定性分析： 第一节 吸附色谱 三、吸附色谱技术应用 2、薄层色谱法 定量分析： 洗脱测定法和直接测定法 第一节 吸附色谱 三、吸附色谱技术应用 2、薄层色谱法 洗脱测定法： 用适当溶剂把层析板上待测物质的斑点中的组分洗脱下来，再测定其含量。 m (标样) 1 2 3 4 5 m 第一节 吸附色谱 三、吸附色谱技术应用 2、薄层色谱法 直接测定法： 目视比较法 薄层扫描法 第一节 吸附色谱 三、吸附色谱技术应用 3、应用事例 用薄层色谱法鉴别异黄酮类化合物 第一节 吸附色谱 三、吸附色谱技术应用 3、应用事例 色谱条件： 固定相：硅胶F254 展开剂：氯仿-甲醇 （50：1、20：1、10：1、5：1） 鉴定法：在紫外365nm下检视黄酮、异黄酮、双氢黄酮类可见斑点。 第一节 吸附色谱 三、吸附色谱技术应用 3、应用事例 用薄层色谱法鉴别氨基酸 第一节 吸附色谱 * 植物化学成分的分离 1、经典分离法 2、离心分离法 3、色谱分离法 总结 经典分离法 1）溶剂法 2）分馏法 3）沉淀法 4）膜分离法 5）升华法 6）结晶法 总结 结晶操作顺序： （1）准备饱和溶液：把要纯化的混合物溶于热的适当溶剂中； （2）将热溶液趁热过滤，除去不溶性物质； （3）形成过饱和溶液：让滤液缓慢冷却，加入结晶液，析出结晶； （4）滤出晶体、干燥并检验晶体的纯度。 总结 离心分离法：利用离心机旋转运动产生的离心力，将悬浮液中的悬浮微粒快速沉降，从而达到分离、浓缩目的的方法。 应用于生物大分子，如蛋白质、酶、核糖体等的分离。 总结 离心分离法时注意事项 a 离心管中的溶液离管口3cm以上。 b 离心管在离心套中两两配平，并对称置于离心机中。 c 速度从低档缓慢调到高档，并低于离心机最高设定速度。 d 有异常响动，应停止离心。 总结 溶剂法利用了物质的相似相溶特性，来提取和分离植物成分。 极性化合物易溶于极性溶剂，同类分子或官能团相似的彼此互溶。 常用溶剂的极性强弱顺序为： 水-甲醇-乙醇-丙酮-乙酸乙酯-乙醚-氯仿-二氯甲烷-苯-二氯乙烷-四氯化碳-石油醚 总结 色谱系统由固定相（固体、液体）和流动相（水、有机溶剂、气体）组成。分为柱层析和薄层层析。 柱层析 吸附层析 分配层析 离子交换层析 凝胶层析 总结 开口柱层析法分离物质的过程： 确定固定相—选柱—填充固定相—加入样品—洗脱—TLC法鉴定组分—分批收集—浓缩 总结 薄层层析的显色方法： 蒸汽显色 喷雾显色 浸渍显色 加热显色 总结 波谱法是植物化学成分鉴定的主要方法，主要包括 核磁共振（NMR） 质谱（MS） 红外光谱（IR） 紫外光谱（UV） 总结 液-质联用技术（LC/HPLC-MS）和 气-质联用技术（ GC/HPGC-MS ）是集植物成分分离、鉴定和定量分析为一体的现代分析技术。 总结 极性：在化学中，极性指一个共价键或一个共价分子中电荷分布的不均匀性。如果电荷分布得不均匀，则该键或分子为极性，反之，则为非极性。 沉降系数：物质在单位离心场下的沉降速度，是物质特有的物理常数。单位为秒。 比移值 Rf=分离物移动的距离/展开剂移动的距离 总结 第一章 色谱学 第一节 吸附色谱 第二节 分配层析 第三节 分光光度技术 第四节 高效液相色谱法 第五节 气相色谱法 第六节 离子交换层析 第七节 凝胶层析 第八节 电泳 第一节 吸附色谱 一、概念 二、吸附色谱技术 三、吸附色谱技术与应用 一、概念：指用吸附剂作固定相，利用被分析组分对吸附剂表面吸附能力的差异和在流动相中溶解度的差异来进行分析分离的方法。 第一节 吸附色谱 二、吸附剂： 硅胶 氧化铝 活性炭 聚酰胺 第一节 吸附色谱 1 硅胶（silica gel） 通式：SiO2.xH2O 第一节 吸附色谱 1 硅胶（silica gel） 通式：SiO2.xH2O 活化：100℃1小时 种类：硅胶G、硅胶CMC、硅胶GF254 应用：分离酸性和中