槲皮素脂质体纳粒对肝癌hepg2细胞生长的抑制作用.pdfVIP

中文摘要 目的 比较僻皮素脂质体纳米粒化后对肝癌HepG2细胞的抑制作用 是否优于纯槲皮素。 1．以适量槲皮素为原料，少量PEG400与5％葡萄糖溶液为试剂， 用1000ml茄形烧瓶、旋转蒸发器为仪器制得槲皮素混悬液。 以磷脂、胆固醇、槲皮素及十八胺／磷脂酰丝氨酸为原料采用 薄膜蒸发一高压均质法分别制备得槲皮素脂质体纳米粒与空 白脂质体纳米粒。 2．以HepG2细胞株为原料，PBS液冲洗。胰酶消化。培养液(高 长状态良好，光亮性好的HepG2细胞。 3．HepG2细胞按每孔5000个／1．5m1接种到24孔扳中，注入 lml琼脂悬液，分别加入7．625mg／L槲皮素，槲皮素纳米粒， u 空白纳米粒(每孔251)，以HepG2细胞为对照(加入PBS每 孔25u1)，培养7～10天，肉眼镜下观察细胞集落，分析槲 皮素纳米粒对HepG2肝癌细胞的抑制情况。 p 4．HepG2细胞按每孔10000个／150l接种子96孔扳，分别加 入不同浓度的槲皮素，槲皮素纳米粒，空白纳米粒进行培养 (每孔50II 1)， 1)，以HepG2细胞为对照(加入PBS每孔50p 24小时，48小时后，用MTT观察细胞生长状况，分析抑制情 况。 106／9m1个接种在4个50ml培养瓶中， 5．HepG2细胞按每孔5X 分别加入76．25mg／L槲皮素，空白脂质体纳米粒，槲皮素脂 质体纳米粒，48小时后裂解提取DNA，分别进行DNA电泳。 结果 1．槲皮素纳米脂质体粒径为133±25rim，载药量为 I 粒径约为164±20nm。 2．HepG2细胞生长的状态良好，数量较多，梭形，光亮性好。 3．通过软琼脂集落培养发现(肉眼镜下观察)，加入PBS细胞集 落约207个，加入空白脂质体细胞集落L约153个，加入槲 皮素集落约132个，加入槲皮素脂质体纳米粒集落约86个。 4．通过MTT发现： 24小时光密度值：同浓度的槲皮素脂质体纳米粒与槲皮素， 空白脂质体纳米粒比较，差异并不明显，与5-Fu比较，只有 浓度3，有明显差异(较同浓度的5-Fu大)。 48小时光密度值：同浓度的槲皮素脂质体纳米粒明显较槲皮 素，空白脂质体纳米粒小，与5-Fu比较，明显较大。 5．通过DNA电泳发现大分子DNA，纯槲皮素，空白脂质体纳米粒， 槲皮素脂质体纳米粒较正常对照组多，而小分子DNA纯槲皮 素，空白脂质体纳米粒，槲皮素脂质体纳米粒较正常对照组 少。 结论进一步证实了槲皮素对HepG2肝癌细胞的抑制作用。脂质体载 体本身也有抑制HepG2细胞的作用(其机理待进一步研究)。在 所使用的浓度范围内，槲皮素脂质体纳米粒对体外肝癌HepG2 细胞的抑制作用更优于纯槲皮素。槲皮素，空白脂质体纳米粒， 槲皮素脂质体纳米粒对肝癌HepG2细胞的抑制作用并不是通 过破坏观察到的DNA而达到的。 关键词HepG2细胞，槲皮素，空白脂质体纳米粒，槲皮素脂质体纳 米粒，脂质体 Ⅱ EffectofNanometer-Granulated Inhibitory Quercetin on for CellofLiverCancer Lipo