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应用基因芯片筛查宫颈癌的相关基因 硕士研究生：胡玉崇 指导教师：唐慧君 教授 专业名称：妇产科学 摘 要 目的：应用基因j签片研究子宫颈癌相关基因群的表达和功能，探 讨基因芯片技术在筛查宫颈癌相关基因中的应用价值。 方法：(1)标本的收集和处理：以3例临床手术切除的宫颈鳞癌 Ib期患者的子宫颈癌组织和3例子宫肌瘤患者的正常宫颈组织为研究 对象，标本切除后立即置于液氮，冻存备用。两种组织标本均经过病 理学检查证实。(2)总RNA的提取和质量判定：分别提取标本的总 纯化，在链合成中掺入荧光素标记的dUTP，用CY-3标记癌组织的 9C杂交15-17小时。每例 靶点、杂交，盖玻片封片，置于杂交仓内，60 标本重复三次。(5)检测与分析：芯片经严格洗片后用 数字化处理，用管家基因对cy。3和cy-5信号值进行校正。以荧光信号 值相差两倍定为判断基因表达差异的标准，获得两种组织中差异表达 的基因信息。取9次杂交中共同出现的差异表达的基因为观察结果。 结果：3例标本中富颈癌组织与正常组织差异表达的的基因，平均 分别为616、567、522条；这些基因中大多数为下调基因，少数为上 调基冈。表达上调的基因主要涉及癌基因、细胞凋亡抑制基因、肿瘤 ·1‘ 转移相关基因、与代谢有关的基因、免疫相关的基因、与蛋白合成有 关的基因等。表达下调的基因主要涉及抑癌基因、凋亡基因、信号传 递蛋白基因、其他如核糖体蛋白基因、蛋白合成延长基因等。其中3 例标本共同差异表达的基因共12条，表达上调3条，分别为MMP．12 基因、ILEl基因、hTERT端粒酶催化亚单位基因；表达下调9条，分 别为4(AQP4)蛋白基因、RPL23A基因、NF KappaB基因、nm23基因、 基因和LOC255147基因。表达下调的基因多于表达上调的基因。 结论：(1)宫颈癌的发生和发展，是多个基因的结构和功能异常 改变的结果，本试验发现与金属基质酶12基因、白细胞介素增加黏附 等多个基因的表达异常有关。(2)运用基因芯片技术可以快速、高通 量、高敏度的筛查子宫颈癌的相关基因。基因芯片技术在宫颈癌的分 子机制的研究中有着很高的应用价值。 关键词： 子宫颈癌 基因芯片 基因表达普 the incervical on expressionpattern gene Investigation withcDNA carcinoma cell microarray squamous Yu Chong Postgraduate：Hu HuiJun Supervisor：Prof．Tang andobstetrics Major：Gynecology ABSTRACT the incervical differentiallygene investigate