核酸化学3探析.pptVIP

第四章 核酸化学 Nucleic Acid NA 七 核酸的生物功能 DNA的生物功能 1 DNA与遗传 DNA是遗传物质 1944年 Avery 肺炎球菌转化实验 1952年 Hershey 噬菌体感染实验 DNA如何将遗传信息传给子代：DNA复制 遗传信息：DNA中核苷酸排列顺序 DNA通过转录将遗传信息传给RNA 转录：以DNA为模板合成与其核苷酸相应的RNA的过程 生物体内DNA双链中只有一条链能转录，称模板链另一条链称非模板链或编码链 翻译：根据mRNA链上的遗传密码转译成相应的氨基酸的过程 基因表达：DNA mRNA 蛋白质 2 DNA与变异 基因突变 碱基取代substitution 碱基加减 复制时漏了或多了一对核苷酸 移码突变frameshift mutation：当加减非3的倍数时 嵌入染料 如原黄素(proflavin)、溴化乙锭(Eb) 、吖啶橙 插入碱基对之间，DNA复制时可引起碱基加减(移码突变) 基因突变 错义突变 无义突变 移码突变 自发突变 酮式→稀醇式 诱发突变 紫外线 嘧啶二聚体 亚硝酸 碱基脱氨 烷化剂(芥子气、氮芥) G的N7甲基化 碱基类似物(5-溴尿嘧啶) 与G配对 3 DNA与遗传性疾病 镰刀形红细胞贫血病的DNA点突变 HbA Glu CTT GAA HbS Val CAT GUA β6 DNA mRNA 白化病的基因缺失 4 DNA与细菌转化 转化作用：从一供菌体得到DNA授与另一种细菌，而使后者遗传特性发生改变 RNA的生物功能 1 RNA与蛋白质的生物合成 mRNA与遗传密码 遗传密码(genetic code)：mRNA上每三个相邻的核苷酸的特定顺序在蛋白质生物合成时体现出某种氨基酸的信号(或合成的终止信号)称遗传密码 密码子(codon)或三联体密码：mRNA上决定一个氨基酸(或合成终止信号)的相邻的三个核苷酸序列 遗传密码表 遗传密码表 由A,U,C,G组成 64个密码子代表了20种基本氨基酸 三个终止信号(UGA,UAA,UAG) 一个起始信号(AUG，Met) 密码的简并性 有的氨基酸有一个以上的密码 从细菌到人都通用 5’→3’ tRNA的作用 tRNA怎样识别相应的氨基酸 通过氨酰-tRNA合成酶 tRNA怎样识别mRNA上相应的密码子 通过反密码子，根据碱基配对规律 rRNA的作用 核糖体：蛋白质合成的场所 有蛋白质合成的起始因子、延伸因子、释放因子，有关酶的结合位点 2 RNA与遗传 RNA病毒 TMV：单链 水稻矮缩病毒：双链 3 反转录(逆转录) 1970年，致癌RNA病毒中发现逆转录酶 八 核酸的水解 碱水解 酸水解 低温对酸稳定 加热后，DNA糖苷键更不稳定 嘌呤比嘧啶更不稳定 酶水解 (一)核糖核酸酶类 1 牛胰核糖核酸酶(RNase Ⅰ或RNase A) 2 核糖核酸酶T1 (RNase T1 ) (二)脱氧核糖核酸酶类 1 牛胰脱氧核糖核酸酶(DNase Ⅰ) 平均每四个切一下，产物为3’-OH，5’-P的寡核苷酸 2 牛脾脱氧核糖核酸酶(DNase Ⅱ) 平均每六个切一下，产物为3’-P，5’-OH的寡核苷酸 3 限制性内切酶 对DNA具有碱基专一性的内切酶 识别序列： 4～6碱基对，大多有回文结构 切点位置一般在识别序列之内 E. CoR Ⅰ 5’－GAATTC－3’ －CTTAAG－ 交错切割，得到黏性末端 Hind Ⅱ 5’－GTPyPuAC－3’ －CAPuPyTG－ 同一部位切割，得到平整末端 (三)核酸外切酶类(RNA、DNA皆可作用) 1 蛇毒磷酸二酯酶 3’-OH开始，产物为5’-核苷酸 2 牛脾磷酸二酯酶 5’-OH开始，产物为3’-核苷酸 (四) 磷酸单酯酶 非特异性 3’，5’都可切 特异性 专切3’或专切5’ 九 核酸含量的测定 1 定磷法 2 定糖法 DNA 二苯胺法 蓝色 595nm RNA