长链非编码RNA+UC001kfo和肝癌侵袭转移的关系.pdf

中文摘要 长链非编码RNAUC001kfo与肝癌侵袭转移的关系 研究生陶丰宝 导师潘延风 郑州大学第一附属医院 河南 郑州450052 摘要 研究背景和目的 目前恶性肿瘤的治疗仍然是一个巨大的难题，这是由于癌细胞能够迅速增 殖，抵抗细胞凋亡，逃避免疫系统和发生体内侵袭转移。目前肝癌居世界恶性 肿瘤死亡原因的第三位，其中肿瘤的侵袭、转移是导致患者死亡的重要原因。 以往肝细胞癌的研究主要集中以下六个方面①分子流行病学，比如：乙型、丙 型等肝炎病毒的感染；②引起肝细胞癌的高危因素：酗酒、黄曲霉毒素污染等； ③分子遗传学：l号染色体结构畸形等；④基因分子生物学：N．ras、p53、p21异 肿瘤组织中异常表达对HCC侵袭的影响等。⑥信号途径的异常。近年随着长链 RNA，IncRNA)的发现，从全新的角度去研究疾病 非编码RNA(10ngnon．coding nt的RNA， 发生发展，长链非编码RNA(IncRNA)是一类转录本长度大于200 缺乏编码蛋白的能力。因为许多研究发现，大部分编码基因都能找到一个或数 个相应调控功能的IncRNA，其可能在转录和翻译水平调控蛋白编码基因的表达， 这为肝细胞癌的研究提供了一个新的途径，然而目前关于lncRNA在肝癌的研究 muscle 动蛋白(a．smoothaction，a．SMA)，并预测可能参与肝癌的侵袭和转移的调 中文摘要 控。 a-SMA是细胞骨架的一部分，参与了细胞的分裂、运动、迁移、形态的维持、 生长等多种重要细胞生理活动。目前关于a-SMA促进肝癌侵袭的的研究，仅通过 免疫组化的方法，得出在早期肝癌及伴门静脉癌栓的晚期肝癌中具有差异性表 达。而UCOOlkfo是一个新发现的基因，既往未有这研究方面的研究，本研究同 时运用逆转录PCR(RT-PCR)、原位杂交、免疫组化的方法，旨在探讨a．SMA、 癌中是否具有差异性表达，同时探讨UC001kfo与ACTA2表达的是否具有一致性 及UCOOlkfo与肝癌侵袭转移的关系，可能为以后肝癌的治疗提供一个新的治疗 依据及途径。 材料与方法 1．收集对照肝组织15例，肝硬化组织15例，肝癌癌组织30例，癌旁组 织25例，其中10例肝癌伴有门静脉癌栓，15例对照肝组织来自于肝血管瘤、 肝囊肿周边正常的肝组织，所有的肝脏组织均来自2010年1月一2011年8月 在郑州大学第一附属医院进行手术切除的肝脏组织，经病理证实为肝细胞癌、 肝癌癌旁组织、肝硬化组织或正常肝脏组织。将肝癌组织按照按病理分化程度 分为三组：低分化组、中分化组和高分化组。不限制年龄、性别。 2．提取肝癌组织总RNA逆转录成eDNA，然后进行PCR扩增，每次PCR内参 J软件进行光密度扫描，a-SMA 对照均选用GAPDH。获取电泳照片，使用Image mRNA的相对表达强度计算方法为a-SMAmRNA的吸光度值与GAPDH吸光度 值的比值，最后比较标本间的表达强度的差异。 3．对于收集的石蜡切片按照说明书步骤，进行ACTA2及UCoolkf0的原位 杂交，以及仅．SMA的免疫组化，应用BioSens DigitalImagingSystem进行图像灰 度值分析观察。 4．检验方法：采用SPSSl7．0进行数据分析，计量资料采用均数4-标准差 仁±s．)表示，两组比较采取t检验，多组间比较采用方差分析。 幺七里 ：I：i木 中文摘要 肝脏组和肝癌组a-SMA 检验结果表明，两组差异有统计学意义(尸O．01)。 2．免疫组化显示a-SMA在对照肝脏、肝癌组织和门脉癌栓组织的表达值分 异有统计学意义(户0．01)