脱乙酰壳聚糖-氟乙酸对变异链球菌抑菌特性的体外研究.pdfVIP

脱乙酰壳聚糖．三氟乙酸对变异链球菌抑菌特性的体外研究 硕士生姓名： 张元鑫 指导教师： 陈小冬 专业名称： 口腔基础医学 摘要 目的：龋病是人类口腔的常见病、多发病，世界卫生组织已经把龋病列为人 类重点防治的三大非传染性疾病之一。变异链球菌是口腔中的常驻菌之一，同时 也是龋病的主要病原菌。壳聚糖(chitosan，cs)是甲壳素脱乙酰化的衍生物，是自然 界中唯一的碱性多糖。独特的分子结构使其具有抑菌、抗肿瘤、增强免疫力、促 进组织再生等功能。因其良好的生物相容性和可降解性，目前己被广泛的应用于 医药领域。独特的理化性质使其便于制成膜、凝胶、微球等各种剂型，可满足多 种施药途径的需要；特有的生物粘附性，有助于抵御唾液的冲刷和稀释。因而在龋 病的预防和治疗方面，具有巨大的应用潜力。 三氟乙酸(trifluoroacetie acid，TEA)是一种含氟有机酸，它是许多有机化合物的 良好溶剂，如与二硫化碳合用，可溶解蛋白质。它也是有机反应的优良溶剂，是 重要的有机合成试剂，由它可以合成各种含氟化合物。关于壳聚糖的抑菌效果已 有不少报导，本研究拟探索脱乙酰壳聚糖．三氟乙酸(cs．TEA)复合物对变异链球菌 的抑菌效果以及对变异链球菌生长和产酸的影响。 方法：测定CS．TFA对变异链球菌的抑菌效果，将CS．TFA加入变异链球菌培 养基中，测定其最小抑菌浓度和最小杀菌浓度，壳聚糖和人工唾液作为对照组。 取96孔板，采用对倍稀释方法用TPY液体培养基配制实验溶液。加入浊度A540 细胞用PBS缓冲液洗两次，PBS缓冲液重悬后，观察三组溶液对变异链球菌的抑 菌作用。无细菌生长的最低浓度即该组溶液对变形链球菌的最小抑菌浓度(MIC)。 离心前，挑取肉眼观察可能无细菌生长的溶液，划线接种于TPY琼脂平板， 37℃厌氧培养，分别观察培养后24h、48h平板上有无菌落生长，无细菌生长的最 低浓度即为该药物对变异链球菌的最小杀菌浓度(MBC)。 用TPY液体培养基将药物配制成2倍终浓度的实验药液，加入TPY液体培 厌氧培养，在培养3h、22h、27h、32h、45h时，分批取出各试管，菌悬液混匀， 3500r／rain离心8min，吸取上清液lml，平铺于玻璃平板上测定其pH值。 结果：CS．耵’A和壳聚糖的最小抑菌浓度分别为1．0和1．5胡，最小杀菌浓度 为20鲫和30鲫，人工唾液组的细菌生长迅速，在接种后16h达到最大浊度，而 而人工唾液组的细菌存活率为93％。 结论：CS．TFA对变异链球菌的生长和产酸均有一定的抑制作用，是一种具有 临床应用前景的防治龋病复合物。 关键词：三氟乙酸．壳聚糖变异链球菌抑菌 2 Effectof chitosan--trifluoroaceticacid on the mutansinvitro inhibitingstreptococcus Master Yuanxin degree candidate：Zhang Professor：Chen Supervisor Xiaodong BasisOfOral Major：The Medicine Abstract cariesisthecommondiseaseandstill the Objeetive：Dental prevale