腺样囊性癌耐药胞株acc-mddp的建立及其多药耐药机制研究.pdfVIP

腺样囊件瘵耐药细胞株ACC．M／DDP的建芷及j∈多药耐药机制研究 其多药耐药机制研究 中文摘要 第一部分人腺样囊性癌耐药细胞株ACC．M／DDP的诱导建立 目的：针对目前头颈部肿瘤在化疗中产生的耐药性问题，建立人腺样囊 性癌耐药细胞株ACC．M／DDP并研究其生物学特性，为腺样囊性癌的临床治 疗提供实验依据。 方法：以腺样囊性癌细胞株ACC-M为诱导对象，顺铂为诱导药物，采用大 剂量冲击和逐渐增加剂量相结合的方法建立了在1ug／m1顺铂作用下生长 化疗药物敏感性，细胞计数法绘制细胞生长曲线，流式细胞术测定细胞周 期。 结果：成功诱导建立了人腺样囊性癌多药耐药细胞株ACC—M／DDP；MTT 胞ACC．M／DDP与ACC．M相Lt-,s期明显增多(PO．05)。 结论：所获得的耐药细胞株ACC—M／DDP细胞性状稳定，是可靠的人腺 样囊性癌多药耐药细胞模型，与亲本细胞ACC—M相比生物学特性有明显差 异。可用于腺样囊性癌多药耐药机制的研究。 腺样囊性编耐药细胞株ACC．M／DDP的建立及其多药耐药机制研究 中的表达及临床意义 表达及临床意义，为研究肿瘤的多药耐药性及其逆转剂提供理论依据。 中的蓄积，RT-PCR检测细胞内MDRlmRNA的表达，建立裸鼠腮腺移植 瘤模型，免疫组化法检测移植瘤模型中P．gP表达情况。 ±1．17)d，耐药组瘤体生长速度缓慢，浸润性降低。免疫组化结果P—gP在 ACC-M／DDP中强表达而在ACC-M中未表达。 结论：由顺铂诱导筛选的腺样囊性癌ACC．M／DDP细胞株产生的多药耐 药性与MDRl／P．gP表达密切相关，其在裸鼠体内可以保持稳定的耐药性， 但是浸润性降低。本研究为采用MDRl逆转剂提高腺样囊性癌化疗敏感性提 供了理论依据。 第三部分 Survivin在介导腺样囊性癌细胞多药耐药性的 产生及凋亡过程中的作用 目的：观察紫杉醇对腺样囊性癌亲本细胞株ACC．2、肺高转移细胞株 ACC—M、顺铂耐药细胞株ACC．M／DDP的生物学作用，检测在此过程中 腺样囊悍痛耐药细胞株ACC．M／DDP的建立及其多药耐药机制研究 肿瘤耐药过程中的作用。 方法：流式细胞仪观察不同浓度紫杉醇对腺样囊性癌ACC．2、ACC—M、 亡，RT-PCR检测三种细胞中survivinmRNA的表达及不同浓度紫杉醇作用于 ACC．M／DDP后survivinmRNA的表达情况，免疫组化观察裸鼠移植瘤中 survivin蛋白表达。 la 结果：流式结果显示小剂量紫杉醇2 g／ml即可对腺样囊性癌三种细胞株 la 产生不同程度的G2／M阻滞，5 u 抑制作用，小剂量紫杉醇(2 la IJ survivLnmRNA表 g／ml紫杉醇作用24小时与2g／ml市1]比ACC．M／DDP 性表达明显高于ACC—M组。 结论： Survivin在抑制肿瘤细胞凋亡过程中起着重要作用，其表达增强 可能是腺样囊性癌产生多药耐药性的原因之一。 关键词：腺样囊性癌，多药耐药，MDRl，survivin 腺样囊惟癌耐药细胞株ACC．M／DDP的建市及其多药耐药机制研究 Establishmentof resistancecelllineofadenoid drug cystic Pandresearchintoits carcinomaACC．．M／DD mutidrug resistancemechanism ABSTRACT