tBHQ作用下rf2信号系统对氟化钠诱导PC12细胞凋亡的保护作用.pdfVIP

目 录 一、摘要 中文论著摘要………………………………………………………………………1 英文论著摘要………………………………………………………………………4 二、英文缩略语………………………………………………………………………．8 三、论文 前言…………………………………………………………………………………………………………。9翮舌…………………………………………………………………………………………………………”9 材料与方法………………………………………………………………………．1l 结果…………………………………………………………………………………………………………17 讨论…………………………………………………………………………………………………………29 结论…………………………………………………………………………………………………………32 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………34 五、参考文献…………………………………………………………………………35 六、附录 综述…………………………………………………………………………………………………………38 在学期间科研成绩………………………………………………………………52 致{射…………………………………………………………………………………………………………53 个人简介………………………………………………_………………………．．54 ·中文论著摘要· 凋亡的保护作用 刖 罱 氟是地球上含量最丰富的第13位元素，在自然界分布很广，是人体必需微量 的元素。自然界中的氟分布极不均匀，不同地域存在很大差异，我国是地方性氟 中毒的高分布国家，现有病县1296个，占全国总县数的46．8％，人口大约为1亿。 氟的氧化能力极强，可以直接或间接地与几乎所有其它元素化合生成相应的氟化 物。因此，氟对于生态环境以及人类健康的影响已成为人们关注的卫生学问题。 有报道表明氟具有神经毒性，中枢神经系统是人体最重要的系统之一，而且 对外源性化合物的毒性作用比较敏感，因此氟对中枢神经系统的损害作用尤其值 得重视。高氟地区流行病学调查显示，长期摄入氟使儿童智商和记忆力下降，从 而危及高氟地区儿童的基本素质，可能造成深远影响。动物实验也证明氟影响学 习记忆，其机制可能与氧化应激相关。 PCI2细胞株源于大鼠嗜铬细胞瘤，具有神经分泌细胞和神经元的性质，已被 广泛应用于神经细胞死亡方式及神经毒理方面的研究。目前，氟的神经毒性已被 证实，但作用机制尚未完全阐明。本研究以类神经元模型PCI2细胞株为研究对象， 观察不同剂量氟化钠处理组PCI2细胞的存活率，细胞内活性氧含量、Nrf2蛋白、 mRNA的表达水平、细胞内谷胱甘肽含量和细胞凋亡率的变 ，／-GCS、HO．1、Nrf2 化，以及给予叔丁基对苯二酚诱导后上述指标的改变情况，以探讨氟化钠对神经 元凋亡的影响、可能机制及Nrf2信号通路对细胞的保护作用，从而为深入开展氟 的神经毒性研究提供新的实验证据。 ’ 实验分组 160I-tg／ml，对照组使用无血清1640。 研究方法 l、MTT法测定PCI2细胞增殖能力 2、DCFH-DA荧光探针法测定细胞内ROS含量 3、Western-Blot法测定细胞内Nrf2蛋白含量 mRNA表达 4、RT-PCR法测定细胞内1,-GCS、HO．1、Nrf2 5、DTNB法测定细胞内GSH含量 6、流式细胞仪法测定细胞凋亡率 结果 l、PCI2细胞增殖能力检测 氟化钠对PCI2细胞有一定毒性，随着染毒剂量的升高而增加，除对照组与 各组差异均有统计学意义(Po．05)。 组对细胞产生毒性，