六价铬对大鼠睾支持细胞ABP、Tf和INHmRNA转录及蛋白表达的影响.pdfVIP

摘要 摘要 铬 Chromium，Cr 作为一种重要的天然金属元素，无论在自然界中还是在工 业生产环境中，都与人们的活动息息相关。铬及其化合物特别是六价铬[C“Ⅵ ] 在许多工业生产中广泛应用。同时，随着社会的不断发展，环境污染越来越严 重，铬及其化合物也包含在汽车尾气中。实验表明，铬及其化合物有免疫毒性、 生殖毒性、神经毒性、致癌性和肾毒性。其中关于铬及其化物对生殖的影响逐 渐被人们所重视。 男性生殖能力下降，以致不育症越来越多，这已是不争的事实。而cr VI 易进入生殖细胞内从而影响生殖系统的正常功能。睾丸为雄性生殖系统中最重 要的生殖腺，同时也是大多数外源化学物生殖毒性的靶器官。而作为睾丸曲细 精管内唯一的体细胞一支持细胞 Sertolicell，SC ，在雄性生殖系统中起着重要 作用。SC能够分泌雄激素结合蛋白 androgcnbindingprotein，ABP 、转铁蛋白 作用，ABP、Tf和INH已经被广泛地用作衡量SC功能的标志。 目的： 本研究通过体外原代培养大鼠睾丸支持细胞，然后使其暴露于不同浓度的 INH的影响。以此探讨重铬酸钾对雄性生殖系统的影响，为进一步研究Cr VI 的雄性生殖毒性机制提供理论依据。． 方法： 1．首先建立大鼠睾丸支持细胞的体外原代培养模型。 2．利用M1vr比色法来测定Cr VI 对支持细胞活性的影响，并且确定染毒浓 度。 3．用实时定量RT-PCR对支持细胞ABP、Tf和INHmRNA的表达进行检测。 4．Western blot法检测Cr VI 作用后ABP、Tf和INH的蛋白表达水平。 of 方差分析 analysis 准仅 0．05 。 结果： 摘要 1．通过本实验方法，提取的大鼠SC存活率95％以上，24h后细胞开始贴壁， 48 h后铺开生长良好，纯化后细胞纯度90％以上。 2．MTT法结果：当浓度为1矿mol／L时，与对照组进行比较，差异无统计学 意义 尸 O．05 ，大于此浓度时，细胞存活率影响明显，因此本课题进一 mol／L、107mol／L和1旷mol／L 步实验采用10-8 3个浓度。 3．实时定量RT-PCR结果：与对照相比，ABPmRNA与INHmRNA在染毒浓 mRNA 度为10刁mol／L和10由mol／L时，差异有统计学意义护 O．05 。Tf 在染毒浓度为10‘6moFL时，差异有统计学意义护 O．05 。 结论： 1．六价铬工作液对大鼠睾丸支持细胞具有细胞毒性。在高于10巧mol／L浓度 时对支持细胞具有毒性作用。 2．六价铬能够引起大鼠支持细胞分泌功能的变化，产生生殖毒性作用。 关键词：六价铬支持细胞雄激素结合蛋白转铁蛋白抑制素 Abstract ． Abstract most metalloiddement in Cr isoneofthe important existing Ithasbeen relatedto0111activitiesbothinnatural environment． closely always and hexavalent andindustrial its environment production．Crcompound，especially alsousedin industrial the many processes．Through chromium【cKVI 】，are advancementofthe andits have increasinglygrave society,Crcompoundimposed Crandits harmonsocialand showthat environment．Experiment ecological areimmune compound toxicity,reproductive been moreandmoreattention which has reproductivetoxicity paid nephrotoxicity，of andknown． tothemale which Thereare factors pollution many contributinginfertility,among moreandmoreattention． factorofenvironmenthasattracted ● ●， ofmale isone Testisisoneofthemost system,and importantgonad reproductive the the ofmostoutchemical only of organs agents．Sertolicell sc as pr