登革病毒2型外E蛋白基因DIII区的表达及其在血清学诊断方面的应用研究.pdfVIP

2 目 录 中文摘要 1 英文摘要 3 主要英文缩写词 5 第一部分 引言 7 第二部分 材料与方法 9 一、材料 9 1. 病毒株及细胞株 9 2. 血清标本 9 3. 质粒和菌种 9 4. 细胞培养所用试剂 9 5. 分子克隆所用的试剂 9 6. 蛋白表达与纯化所用试剂 10 7. 抗体 10 8. 主要仪器和设备 10 9. 主要的生物软件及分析工具 11 二、方法 11 1．病毒的增殖及间接免疫荧光法（IFA ）验证病毒增殖情况 11 2 ．病毒RNA 的提取 11 3 ．Den2 E 基因片段的扩增及TA 克隆的构建。 12 4 ．Den2 E 基因DⅢ区片段的扩增及表达载体的构建 15 5 ．BL21 （DE3 ）感受态细胞制备 18 6 ．重组蛋白的小量诱导表达及免疫反应性检测 18 7 ．重组蛋白的大量表达与纯化 20 8．重组蛋白抗原应用于ELISA 检测