磺胺类兽药免疫体金快速检测试纸条的研制.pdfVIP

磺胺类兽药免疫体金快速检测试纸条的研制.pdf

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磺胺类兽药免疫体金快速检测试纸条的研制

摘 要 本论文利用胶体金作为标记物,根据竞争抑制免疫层析原理,对磺胺类兽药残留 快速检测试纸条方法进行了系统的研究。通过优化各项实验指标,利用磺胺类药物多 克隆抗体和半抗原偶联物(S4.OVA)研制出磺胺类多残留免疫层析试纸条;利用抗磺 胺二甲嘧啶多克隆抗体和半抗原偶联物(S彪.OvA)研制出磺胺二甲嘧啶免疫层析 试纸条。 采用柠檬酸三钠法制备40m胶体金,电镜鉴定后标记多克隆抗体,半抗原-o.vA 和羊抗兔二抗分别作为检测带和质控带包被在硝酸纤维素膜上,金标记抗体喷涂在玻 璃纤维垫上,制成免疫层析快速检测试纸条。 磺胺二甲嘧啶试纸条的方法检出限为1“g/L,磺胺类多残留试纸条方法检出限: 磺胺噻唑、磺胺异嗯唑、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺甲氧嗪、磺胺吡啶分别为2“g/L、2pg/L、 5“g,L、5pg,L、5pg/L。 以猪肉、鸡肉、牛奶、鲫鱼为实际样品(经瑚?LC检测为阴性样品)进行磺胺类药 物的添加回收实验,以甲醇为提取溶剂,磷酸盐缓冲液PBS.0.05%№为基质掩蔽 剂,稀释一定倍数后即可消除基质影响,用于试纸条的检测。五种磺胺药物在四种样 品基质中的最低检出限均等于或低于眦(100pg/】kg):磺胺二甲基嘧啶在四种样品 基质中的最低检出限均等于或低于MRL(20 p∥kg). 通过高效液相色谱法验证了试纸条检测方法的有效性。结果表明试纸条在其检测 范围内与}玎?LC检测结果一致性较好,验证了该检测方法的有效性。 试纸条分别密封保存于4℃、37℃一段时间后做稳定性测试,结果表明在4℃密 封干燥条件下试纸条放置6个月内可保持检测结果的可靠性。 该试纸条检测方法灵敏度高,快速,简便,10min内即可得出检测结果。所研制 的两种试纸条适用于动物源性食品中磺胺类药物残留的大批量现场检测。 关键词t磺胺类药物:胶体金;免疫层析试纸条;快速检测 ABSTRACT A b∞edonthe of cOlloidal competitivc嬲sayprincipleimmuIlo硒sayusing 90ld鹪 in w嬲殉mied. 慨rfort:he on—sitedetectionofsulfonamidesresiduesfood rapid smnples tlleVario啊f如tors觚dconditionsofthe 觚盯0ptimiziIlg teSt,惦ing antibody醐d gold polyclomantibody,S4-O、後,Ⅱ圮anti-SMZ teSt formedete加:li嘣ionof ilImmnochromato伊印Mcmpid 妯pw嬲deVeloped sulf-0naIlli(1esr.esidues. witll t0 it Goldcmoridew嬲reducedsodi啪citratemaI汜40衄colloidal gold,nlen w弱labeledt0 meridentification.Theand antibody hapten-OVA90at n圮polyclonal 觚ti—ml’bitwered

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