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甲状旁腺素对小鼠造血系统损伤的改善作用 中文摘要 中文摘要 目的：本课题主要研究具有明显调节骨代谢作用的重组人甲状旁腺素 (RecombinantHuman Parathyroid 护作用。分为四个部分，一、研究rhPTH对小鼠骨髓造血干细胞动员的作用；二、 研究d心TH对慢性苯中毒小鼠造血损伤的改善作用；三、研究rhPTH对免疫诱导 的急性再生障碍性贫血模型小鼠造血损伤的改善作用；四、研究rhPTH对免疫诱 导的慢性再生障碍性贫血小鼠造血损伤的改善作用。 rhPTH腹腔注射，生理盐水对照组注射等容积生理盐水，第8天采用血细胞分析 仪检测外周血细胞数量，用集落培养法测定外周血中的造血祖细胞，流式细胞仪 (Granulocyte—ColonyStimulating CellDerivedFactor l，SDF．1)。(2)皮下注射苯油混合液制作慢性苯中毒造血系统 rhPTH治疗组和 损伤模型，将模型小鼠随机分为3组：生理盐水治疗组、40．g／kg 80 rtg／kg 周。使用外源性脾结节法检测造血干细胞；集落培养法测定骨髓造血祖细胞；血 细胞分析仪检测外周血细胞数量；称重法测定脾脏系数。(3)DBA／2J小鼠淋巴结 和胸腺的淋巴细胞以2：1比例混合，尾静脉注射于6．0Y射线照射的Balb／c小鼠， Oy rhPTH， 制作急性再生障碍性贫血模型。rhPTH治疗组每周5次腹腔注射80 I_te,／kg 生理盐水对照组注射等容积生理盐水，从造模前2周至造模后l周，共计给药3 周。以CD34+细胞水平反映造血干细胞：以集落培养法检测骨髓造血祖细胞；血 细胞分析仪测定外周血细胞数量；称重法测定脾脏系数。(4)DB舭J小鼠的单纯 淋巴结细胞，尾静脉注射于5．0Gy丫射线照射的Balb／c小鼠，制作慢性再生障碍 性贫血模型。rhPTH治疗组每周5次腹腔注射80rhPTH，对照组注射生理盐 pg／kg 水。在造模前l周开始直到造模后33天，共计给药6周。以CD34+细胞水平反映 骨髓造血干细胞；集落培养法测定骨髓造血祖细胞；血细胞分析仪检测外周血细 胞数量；称重法测定脾脏系数；细胞周期反映骨髓细胞DNA增殖情况。 中文摘要 甲状旁腺素对小鼠造血系统损伤的改善作用 结果：(1)经80rhPTH连续7天给药的rhPTH处理组小鼠的外周血白 gg／kg 细胞、外周血祖细胞以及外周血干细胞均显著高于生理盐水对照组(．胙O．05)，而 以促进骨髓造血干／祖细胞的动员，但不是通过增加G．CSF和SDF．1介导的。(2) 与生理盐水对照治疗组相比较，经过rhPTH治疗的慢性苯中毒小鼠的造血干细胞 数显著增加(胙0．05)，而脾脏系数明显降低(萨0．05)。但是反映造血干细胞进一 步分化的骨髓造血祖细胞以及外周血细胞数量在各组之间没有显著性差异。(3) 模型小鼠较正常小鼠骨髓造血干细胞、骨髓造血祖细胞、外周血细胞数量以及脾 脏系数等明显减少，说明免疫诱导的急性再生障碍性贫血小鼠的模型制作成功。 与生理盐水对照治疗组相比较，经过rhPTH治疗的急性再生障碍性贫血小鼠的造 血干细胞比例显著增高(p0．05)；而其它指标如骨髓造血祖细胞、外周血细胞数 量和脾脏系数等无显著性差异。(4)经过rhPTH治疗的慢性再生障碍性贫血模型 小鼠的造血干细胞数量和脾脏系数显著增高(∥O．05)，并且反映骨髓细胞DNA 分裂增殖能力的指标S．G2．M期的细胞比例明显升高(卿．05)；而骨髓造血祖细 胞和外周血细胞数量并没有显著增加。 结论： l、rhPTH促进骨髓造血干／祖细胞动员，但没有发现这种动员作