溃结汤对大鼠溃性结肠炎治疗作用及肠粘膜PPARγ影响的研究.pdfVIP

中文摘要 演结汤对大鼠演疡性结肠炎治疗作用 及肠粘膜PPA御影响的研究 摘 要 目的:细胞因子的研究是目前溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)治疗的主要探讨方向，最近的研究集中在调节 细胞因子产生和激活的转录因子上，包括过氧化物酶体增 殖物激活受体y(PPARy),x基因结合核因子 (NF-r,B), 丝裂原蛋白激活激酶 (MAPK)P38、和Janus激酶唁号 转导者和转录激活者 (JAK/STAT)等。尽管这些转录因 子在UC发病中的确切作用尚不清楚，但专家们相信进一 步的研究必将为治疗UC提供一些新的靶目标。 过氧化物酶体增殖物激活受体 y(peroxisome proliferators-activatedreceptory,PPA助)为核激素受体超 家族成员，最近认为其在调节细胞因子水平方面有重要作 用。PPARy富含于结肠上皮细胞，其对肠道粘膜有一定的 保护作用，UC的免疫学发病机制是否和PPARy的表达有 关已经引起重视。Nakajima等首次用动物试验证实， PPARy缺失的小鼠，在进行肠道缺血再灌注损伤后，肠粘 膜损伤明显比正常鼠严重，而且肠组织内髓过氧化物酶 (W O)、细胞间粘附分子 1(ICAM-1)、肿瘤坏死因子a (TNF-a)明显高于正常鼠。说明PPARy能够抑制炎症因 子的产生，进而保护肠粘膜。有研究表明PPARI被激活 后可以抑制单核细胞和巨噬细胞中多种细胞因子的表达， 同时发现PPARy配基明显抑制IL-10诱导的肠系细胞 Caco-2内IL-8等嗜中性粒细胞趋化因子的产生，证实了 PPARI在免疫调节中的作用。Su等利用免疫组化分析技 术发现PPARy在硫酸葡聚糖(dextransulfatesodium,DSS) 诱导的溃疡性结肠炎大鼠肠粘膜中表达明显减少，用 PPART配基治疗后PPARy表达明显上调，UC的症状明显 缓解。因此认为 UC 的免疫学发病机制可能和肠豁膜 PPARI表达下降有一定的关系。目前，国内尚未见有关 PPA即在UC实验研究中作用的报道。本实验旨在探讨 UC大鼠肠粘膜PPARy的表达以及河北医科大学第三医院 肛肠外科自拟中药一溃结汤 (KIT)对PPARy表达的影响 和对UC的治疗作用。 方法:1.UC动物模型的建立:取50只健康成年Wistar 大a (体重 270120g，雌雄各半)，应用复合法 (2,4一二 硝基氯苯+乙酸)制备细胞免疫反应性UC大鼠模型。 2.动物分组及处理:取己造模成功Wistar大鼠40只， 随机均分为模型组、KTI，低剂量组、KIT高剂量组、柳氮 磺氨毗吮SASP)组，并设10只正常Wistar大鼠为对照 组。KJT低剂量组和KJT高剂量组分别以KTT生药lOg/kg, 20g/kg煎成汤剂灌胃，SASP组以SASPO.2g/kg用蒸馏水 制成悬液灌胃，模型组及对照组给予等量生理盐水灌胃。 各组动物均灌胃2周，每天一次。并观察动物临床表现， 然后以10%水合氯醛(350m}1kg体重)腹腔注射麻醉， 剖取距离肛门2-1Ocm结肠共8cm，沿肠系膜缘剪开肠腔， 用生理盐水清洗干净，称量结肠重量，而后平展于8倍放 中文摘要 大镜下，进行肉眼观察和形态学分析.然后用已消毒锋利 刀片切取5XlOmm大小的结肠组织(模型组包括部分结肠 溃疡创面在内)，浸泡于4%多聚甲醛，用于HE及免疫组 化染色。另外，切取3X3mm大小的结肠组织 (模型组包 括部分结肠溃疡创面在内)，浸泡于2%(pH7.2-7.4)戊二 醛中固定，置于4℃冰箱，用于扫描电镜样品制备。 3.观察指标:(1)结肠重量;(2)大体形态粘膜损伤 程度评分:(3)HE染色病理观察;(4)扫描电镜 (SEM) 肠粘膜损伤观察;(5)PPARy免疫组化染色镜检、图像分 析系统处理。 结果:1.大鼠的一般情况、结肠组织大体观察、结肠重 量和肠粘膜损伤程度评分:(1)一般情况:50只造模动 物于造模起 1-2周，相继出现局部皮肤炎症损害及结痴， 动物毛色失去光泽，精神倦怠甚至萎靡，活动及进食明显 减少，体重下降等变化。造模完成后 5-10天，所有造模 动物开始腹泻，其肛周污秽、