灰树花胞外多糖防化学性肝损伤的研究.pdf

摘 要 本论文以灰树花胞外多糖(GFP)为主要研究对象，对其进行了三方面的研 究。l，应用苯酚．硫酸法测定中性糖的含量，通过超滤．渗滤法除去GFP中的小 分子杂质，并通过对GFP进行超滤处理，将其分为三个分子量范围，分别命名 2，通过对【广02肝细胞进行体外抗CCL4化学性肝损伤的研究，确定具有较好保 护肝脏活性的组分，对丙氨酸氨基转移酶，天门冬氨酸氨基转移酶进行测定，检 测细胞周期，测定耵师．Q和cYP2E1蛋白量的表达，荧光显微镜检测ROS的 荧光强度，以及HE染色等一系列的相关试验，对灰树花胞外多糖进行了初步的 抗CCL4化学性肝损伤机理的研究。3，通过建立的CCL4急性肝损伤模型对GFP 抗CCL4化学性肝损伤进行小鼠体内试验研究，通过对与肝损伤相关的实验指标 的检测，来确定GFP抗CCL4化学性肝损伤的效果，血清中的检测指标有：丙氨 酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、过氧化氢酶、一氧化氮、血脂相关指标； 肝组织中的检测指标有：丙二醛、肝糖元、乳酸脱氢酶。还通过HE染色进行了 组织学观察，并对肝脏脂肪酸进行了气相色谱分析。 通过GFP抗CcL4化学性肝损伤的体外和体内实验的研究，实验结果表明， 性肝损伤的保护作用主要表现在防止肝细胞氧化的作用上，通过降低n师．a和 a四2E1蛋白量的表达，ROS的荧光强度，以及在Vc之后，肝损伤指标也相应 降低更加可以说明GFP．2对CCL4化学性肝损伤的保护作用是与GFP．2的抗氧化 作用密切相关的。花生四烯酸，EPA等不饱和脂肪酸对人体有很重要的作用，通 过对肝脏脂肪酸进行了气相色谱分析，GFP可以保护肝细胞中的不饱和脂肪酸不’ 被氧化，而且通过相应动物试验指标的测定，也可以说明这个结论。总体结论说 明，灰树花胞外多糖对cC【4所致的化学性肝损伤具有保护作用。 关键词：灰树花；胞外多糖；四氯化碳；急性肝损伤 ABSTRACT 111is focusedresearchon fbm paper eXo·polysacch撕de aIldthree wercc枷cd neu缸al contentwasdetemlined out．Fhstly，me aspectS sugar acid molecule werer朗∞vIed me也。也small bypheI】【ol·sul如ric impuritieS by n10lecularofGFPwere ul仃a血l劬瓜on-p凹colatio玛Ⅱl】僦：di妇衙entweight obtair埘by ultra虚lh砸。玛wllich studiedtlle e虢CtsillⅥhDof GFP-3@埘p50KD)．Secondly，11lisp印er protective 0n induccdCCL4．TodetemiIle砌Ch GFPliv盯叫ury by molecul缸wei曲tr龇ge w曲ab础cr e丘如0n actiViti锱ofa1a11：i11e锄in0仃amfe pfotectiVe liV凹蛔uⅨ111e detectionof (A∽aIld鹊partate锄ino衄s蠡玎勰e(AST)，Cencycle，ⅡleeXprcssion and d酏ectionof a旧2E1TNF一如nuor鼹c饥cc ROS，aIld were