银杏叶浸膏中异李黄素的提取与分离研究.pdfVIP

竺塑苎竺查竺 竺圭竺苎竺兰! 银杏叶浸膏中异鼠李黄素的提取与分离研究 九七级研究生吴晓明 指导老师 殷斌恚 摘 要 银杏叶制剂临床上广泛用于治疗心脑血管疾病，其有效成分为黄酮类 和银杏内酯类化合物。银杏黄酮主要是槲皮素、山奈酚和异鼠李黄素的甙 类化合物，银杏总黄酮的测定多采用高压液相色谱法(HPLC)，将银杏叶 提取物水解后测定其主要的三个甙元，再换算成总黄酮含量，但槲皮素、 山奈酚、异鼠李黄素标准品常不易得到，尤其是异鼠李黄素价格昂贵，国 内尚无厂家提供。需从国外进口。本实验拟采用常规的柱分离技术，以银 杏浸膏为原料，通过水解、提取、分离、结晶等步骤得到异鼠李黄素单体， 并与标准品对照进行鉴定。 筒先，将银杏叶提取物水解，因银杏黄酮多以甙类形式存在，且种类 繁多水解后成分较为单一，便于提取。比较5％硫酸和25％盐酸的水解 效果表明25％盐酸的效果较好，但考虑到实验条件，采用5％硫酸水解。 水解液过滤，由于甙元成分在水溶液中溶解度低，滤液中三种甙元的含量 仅占34．1％，28．1％和16．5％，因而需对滤液、滤渣分别进行处理。滤液 分别用氯仿、乙醚、氯仿：乙醚(5：5，3：7)萃取，HPLC分析表明，乙 醚对三种甙元成分提取率最高，为90％、84％和89％。但氯仿萃取异鼠李 黄素的相对含量最高，达到46．5％，故采用氯仿做为萃取溶剂；滤渣用氯 仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇浸泡，薄层层析(TLC)分析表明，乙酸乙酯 同济医科大学 硕士掌位论文 时异鼠李黄素提取效果好，而对杂质溶解少，采用乙酸乙酯做为滤渣的提 I 奴溶剂。 提取物经聚酰胺湿柱和硅胶干柱层析分离，通过薄层层析探索柱层折 条件。聚酰胺薄膜层析发现采用氯仿：甲醇：丁酮(5：1：2)分离效果较好， Rf=0．67，0．59，0．51,0．40，以此条件进行聚酰胺湿柱分离，HPLC分析表明， 异鼠李黄素与山奈酚能达到一定程度的分离(R=O．42)，但由于所用聚酰胺 粉粒度较大，杂质难以除去，而且薄层条件不能完全适用于湿柱分离，二 者分离效果欠佳。硅胶薄层层析发现氯仿：乙醇(8：1)分离效果较好，Rf =0．63，0．56，0．47，0．32，以此条件进行硅胶干柱层析，两次分离，TLC分析表 明异鼠李黄素分离效果较好。分离出的异鼠李黄素粗品进行结晶，比较氯 仿、乙醚、丙酮、甲醇的结晶效果，发现采用氯仿、乙醚混合液进行结晶， 效果最好。结晶的异鼠李黄素与标准品对照进行鉴定，通过熔点测定、薄 层色谱、高效液相色谱、紫外光谱、红外光谱、质谱的分析表明：样品与 标准品的熔点一致；薄层色谱呈单点：高效液相色谱呈单峰，样品纯度为 92％；紫外光谱，质谱吻合很好；红外光谱基本一致。综合所有分析结果 可认为该实验方法能从银杏叶浸膏中提取，分离出具有较高纯度的异鼠李 、 黄素单体。)， 0 ／’ 关键词：银杏黄酮类化合物异鼠李黄素提取分离 竺塑苎兰查竺——j墅型竺竺兰兰∑ of andIsolation Extraction LeavesExtracts from Biloba Isorhamnetin Ginkgo GraduateWu Xiaoming YinBinzhi Director Abstract been used of