七方胃痛颗粒对p感染胃粘膜上皮细胞tff1表达影响的研究.pdfVIP

目 录 中文摘要 3 英文摘要 4 主要缩略词表 6 引言 7 正文 9 1 实验材料 13 1.1 细胞与菌株 13 1.2 实验动物 13 1.3 实验药物 13 1.4 主要试剂 13 1.5 主要仪器 14 2 实验方法 15 2.1 药物血清的制备 15 2.2 细胞的培养与保存 15 2.3 菌株的培养与保存 17 2.4 幽门螺杆菌与细胞共培养 18 2.5 一般情况 18 2.6 RT- PCR 检测方法 19 2.7 统计方法22 3 结果 22 4 讨论 24 4 .1 中医对胃癌的认识24 4 .2“ 七方胃痛” 方剂组方依据 31 4 .3 现代医学对七方胃痛颗粒的研究37 4 .4 七方胃痛颗粒对 TFF1 表达的影响 37 4 .5 幽门螺杆菌（Hp ）与AGS 细胞 38 1 4 .6 关于中药治疗肿瘤存在的问题与展望 39 结论 42 参考文献 43 综述 49 致谢 57 攻读学位期间发表的学术论文目录 58 作者声明 59 个人简历 60 2 中 文 摘 要 目 的：通过观察七方胃痛颗粒对Hp感染胃粘膜上皮细胞TFF1表达水 平的影响，来阐明其对胃癌的治疗作用。 方 法：清洁SD 雄性大鼠，体重220-250g ，七方胃痛颗粒药物灌胃， 制备药物血清，-80℃保存备用。从体外活细胞实验着手，将幽门螺杆菌 （Hp ）按100：1 感染人胃粘膜上皮细胞（AGS ）后共同培养24h ，施以 临床疗效确切不同浓度七方胃痛颗粒药物血清，采用逆转录聚合酶链反 应RT-PCR 方法检测TFF1mRNA 表达。 结 果：观察细胞的一般生长情况,与空白对照组相比，Hp作用的AGS 细胞在共培养8h后细胞发生明显的脱壁现象。贴壁细胞周边及培养液中 可见较多菌体，及细胞崩解后的残留颗粒。用RT-PCR方法检测TFF1表达， 结果显示：空白对照组可见TFF1mRNA 的表达，其余各组TFF1均有不同 程度的表达。各组TFF1mRNA表达水平：与空白对照组相比，模型对照 组、药物低剂量组、药物高剂量组TFF1mRNA表达明显增强（P0.01 ）， 与模型组对照组相比，药物低剂量组与药物高剂量组TFF1mRNA表达有 差异（P0.01) ，药物高剂量组与低剂量组TFF1mRNA表达比较（P0.05 ）， 具有统计学意义。 结 论： 1 、应用 RT-PCR 方法验证人胃腺癌细胞 AGS 中存在 TFF1mRNA 表达；2 、幽门螺杆菌感染AGS 细胞后，TFF1mRNA 表达增 强；3、七方胃痛颗粒可增强 TFF1 基因表达水平。4 、AGS 细胞系可作 为探讨TFF1 基因表达诱导因素的细胞系。 关键词：七方胃痛颗粒；三叶因子 1；胃癌；Hp 3 The Effect Of Qifangweitong Granules For Helicobacter Pylori Attack On TFF1 Expression In AGS Cells Abstract Objective: Through the observation of Qifangweitong Granules to Hp infection gastric mucosal epithelium cells TFF1 expression level of the influence to elucidate the role of stomach cancer treatment. M