树莓叶中黄酮类化合物提取、分离及结构鉴定的研究.pdfVIP

摘要 树德在我国北方山区分布广泛，具有绝对的资源优势，而且栽培面积遥在不断的扩大。 树莓不仅是一种美味水果，而凰在化妆品、保健食品加工方面有着广泛的用谂。其根、茎、 叶皆能入药。有研究表明：树麟果实和叶中黄酮化含物具有抗氧化和清除自由基功能。本试 验以承北农业大学园艺站提供的树莓叶为原料，探索树莓叶中的黄酮类物质掇取、分离工艺， 莠对箕遴牙绝梅分辑硪究，为瓣莓迸一步广泛开发翻翊绳供辩学镀据，娃鬣滋拷莓时的剩用 蛰毽。 零试验建立了树莓竹中黄酮类化合物的双波长静光光度法和高效液捆色谱法两种分析检 测方法。通过波谱扫描确定双波长分光光度法的测定波长为506nm、参比波长为572nm，此 法能够克服底液强吸收带来的干扰。高效浓相色谱分析法色谱条件为：采用柱 Agilent-(3t314A紫外检测器{壤滠：室温。 零试验致辩莓辞终为臻突jc譬象，对箕蓑酮纯会秘进行了撵褒工艺磋究。采用纾缝素酶酶 解与不簿溶液浸提相结合的方法对提取各因素避{亍了攀因素和正交试验，确定了试验最优提 取条件为：纤维素酶浓度0．35mg／mL，酶解时间1．5h，酶解温度50℃，介质pH为4．0：液料 比为20mL／g，浸提时间为2h．浸提温度75(2，乙醇浓度为65％，总黄酮禽缀达3．46％。 LH．20凝胶柱色谱 在提取物分离工艺中，引入了太孔吸附树脂、磷胶柱色谱、Sephadex 新技术。通过对树腊种类的筛选、影响吸附和解吸因素的研究，建立了树滕纯像树莓叶提取 镌豹王芑：透露AB-8丈魏裁黔撵l蠢为啜聪裁，分慕瓣莓蟹黄黎较适宜鹣暇辫条磐舞：瘴逮 流速为1．5mL／min。以此工芑绘制的洗脱曲线结槊袭明．采用此纯化工艺取得较理想效果， 洗脱峰壤中，对称性好，无明嶷拖尾现象，洗脱率为45．62％。 树脂纯化后的浸膏用乙馘己酯萃取，乙酸乙酯艨用柱层析硅胶拌匀．囊空干燥，千法装 拄，粥筑仿；甲酵梯度洗脱(100；0-80：20)，用蔗“，“簿：东：乙酸(4：5：1)作展开裁， 纸瑟疆捻验洗麓滚，舍著溅份。羯裹效滚籀捡瓣疆黢缝纯基农瓣罄努懿成分，著测其含量， 检测出承解成分主要为贰元槲皮素和山奈酚，计算出瓣料中掰皮素和出奈鼯的含量分别为 l86．41_lg／g、52．9p．g／g。 辟；I SephadexLH一20凝胶糨色谱对水解物进行分离，用50*／,-．-90％甲醇溶液进行梯度洗脱， 洗脱流逋为IrnL／min，通过姒￡、HPLC检测，台并相同组分．得到两种化食物：通过对两 种化台物物理常数熔点的测定、TIC和HPLC检测，检验了两种物质的纯度；运用紫井、核 磁共掇渡谣学，臻合纯学定镶浆聚貔方法，对嚣静玩会豹送行7结稳鍪定，确定嚣季孛物震分 剐为槲皮索和由奈酚。 关键词： 树莓叶：黄酮类化裔物；分离：结构鉴定 V The andStructuralIdentification Extraction，Purification ofFlavonoidsin LeavesofLitte Raspberry Berry Abstract is and existed moremore an l警SOUrCeand 髓艟raapbemy,which now,isimportant planted plant inmountainousa黼innorthofOUr not oIledeliciousfruitbutalSO used counwy．1t{Sonly widely forthe ofcosmeticand care the andleaves