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杜鹃花属药用植dna条形码的鉴定研究

中文摘要 DNA条形码技术是利用一段(或几段)通用的、相对较短且具有足 够变异的易扩增的DNA片段对物种进行鉴定,它是依据DNA]g/段在物种 内的特异性和种间的多样性而创建的一种新的物种鉴别方法,能够实现对 物种的快速和较客观的鉴定。本文选用生物多样性丰富且药用资源较多的 杜鹃花属植物作为对象进行DNA条形码鉴定研究。 为评价和比较几个热点推荐的DNA条形码候选序列对杜鹃花属药用植 序成功率、种内和种间变异,进行barcodinggap分析,采用BLASTl和 Nearest Distance方法评价四个不同序列的鉴定能力。结果显示: psbA-trn腑列在所研究的杜鹃花属药用植物中的测序成功率为86.8%, ,6以序列为89.7%,核ITS2序列仅为50%;psbA-trnH序列提供了最大种间 变异且Wilcoxon检验表明其种间最小变异明显大于其种内最大变异,较有 barcoding 利于物种的鉴别; gap-与其他DNA条形码候选序列相比具有明 序列扩大应用至94个样品,依然具有93.6%的鉴定成功率,即使对于其中 属甚至是一个组或一个亚组,将其确定到一个较小的分类范围,具有一定 鉴定意义。因此,psbA-trnH序列可以作为这四个序列中杜鹃花属植物条 形码首先推荐的序列。 有关杜鹃花属的属下分类一直存在争议,由于psbA-trnH序列在杜鹃 花属物种的鉴定方面表现出了较好的鉴定能力,本研究运用psbA-trn腑 列的测序结果,选用杜鹃花属7个亚属37个物种的样本,用MEGA4.0进行 相关数据分析,并构建聚类树,对杜鹃花属各个亚属的分类地位进行了探 讨,为进一步深入研究杜鹃花属植物的亲缘关系提供分子系统学证据。结 果表明杜鹃花属37个种的样本聚为7枝,与《中国植物志》上分类系统相 符,支持《中国植物志》杜鹃花属下亚属的分类系统。这也从系统进化的 角度,证实了psbA-trntt序列在杜鹃花属植物分类和鉴定中的作用。 杜鹃花属药用植物同名异物、同物异名现象严重,混淆品和伪品较多, ITS2片段在中药材的物种鉴定方面具有潜在的研究价值。本文考察利用 ITS2序列对杜鹃花属10种常用中药原植物进行鉴别的可行性,为ITS2 序列准确鉴别这些药用植物提供分子证据,结果表明ITS2作为DNA条形 码序列能够准确区别10种杜鹃花属药用植物。 发育 i Ci naI i forChi neseMed AssessmentofcanddateDNAbarcodes PI antsfromGenusRhododendron i aI i i enceofChi neseMateri aMedi ca Specty:Sc i mei Li u Author:Y Tutor:KeI.Chen Abstract DNA iSa new toolfor and barcoding biological accurately ectivelident ies US shortandStandardDNA specby ing obj y ifying ionsthatcanbe ifledeasi PCR.Oneofthe reg ampl lyby problems wasthatthe Studieswere in DNAbarcodereseaches previous plant carrledo

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