复元愈肝胶囊对肪肝大鼠影响的实验研究.pdfVIP

Y89{71l 郑重声 明 本人的学位论文是在导师指导下独立撰写并完成的，学 位论文没有剽窃、抄袭、造假等违反学术道德、学位规范和 侵权行为，本人愿意承担由此而产生的法律后果和法律责 任，特此郑重声明。 学雠文储。蚴：勉 2006年5月2日 摘 要 目的 复元愈肝胶囊以中医理论为指导，结合现代药理学成果而创制，在临床应用 中对多种原因引起的脂肪肝疗效显著，为阐明其药理作用，探讨其作用机制，本 课题观察复元愈肝胶囊对脂肪肝模型大鼠的防治作用，为临床提供科学依据，并 为进一步研究和新药开发打下良好的基础。 方法 star大鼠65只，饲养于18℃一22℃、明暗各12小时的清洁级动物实 健康雄性wi 验室内。正常喂养l周后随机分为两组：模型组(55只)和正常对照组(10只)。 模型组饲以高脂高胆固醇饲料；正常对照组(简称正常组)饲基础饲料，各组均 自由进水。8周后，从模型组随机抽取5只，1o％水合氯醛溶液行腹腔麻醉，取血查 血脂，处死取肝脏做病理切片，验证造模是否成功。50只造模成功大鼠，再随机 分为复元愈肝胶囊低剂量组、中剂量组、高剂量组(分别简称复低组、复中组、 复高组；灌胃浓度依次为o．2、0．4、o．89／m1)及东宝肝泰组(简称对照组；灌 胃浓度为90mg／m1)与模型对照组(简称模型组)，每组10只。复元愈肝胶囊组及 东宝肝泰组各以其混悬液按1ml／1009／d灌胃；正常对照组及模型对照组各以同 等容积蒸馏水灌胃；各组均喂饲基础饲料，共4周。实验过程中观察大鼠一般情况。 自实验正式开始后12周末，于最后1次给药禁食12h后麻醉状态下从眶静脉采血后 处死，迅速按常规分离血清，剪取部分肝组织，肉眼观察大鼠肝组织形态，光镜下 观察肝脏病理形态学变化；另取部分肝组织，70％乙醇固定，置于。一4℃冰箱待检。 糖(FBs)；应用放射免疫法测定血清胰岛素含量，根据血清胰岛素水平(FINs) ／22．5；运用流式细胞仪检测大鼠肝细胞凋亡，免疫组织化学法检测Bcl一2、Bax 基因蛋白表达。 结果 l与模型对照组相比，复元愈肝胶囊低、中、高剂量组能显著降低血脂，改 善肝功能(Po．05)，明显优于东宝肝泰对照组(PO．05)。与正常组比较，模型组 的空腹血糖、胰岛素、胰岛素抵抗指数呈增高趋势，但差异均无统计学意义 (Po．05)。模型对照组大鼠肝细胞凋亡程度明显高于各用药组及正常对照组 (P0．05)；各用药组与模型对照组比较，肝细胞的凋亡率明显下降(Po．05)， 2一般情况观察：正常组大鼠毛发光泽，体态活泼，反应敏捷，食量、排泄 物均正常。模型组大鼠毛发欠光泽，活动减少，粪便时稀软。各用药组大鼠毛发、 体态、反应、食量、排泄物基本正常。模型组前2周进食量减少，体重增长较正 常组稍缓慢，可能与不适应高脂饲料有关。以后各组大鼠体重增长速度接近，实 验结束时各组大鼠体重均无显著差异(PO．05)。 3大鼠肝脏外观形态学变化：正常组大鼠肝脏外观颜色鲜红、边缘锐利、质 韧；模型组大鼠腹腔脂肪组织明显增多，肝脏体积明显增大，包膜紧张，边缘变 钝，肝外观呈奶油黄或红黄相间，质地变软，切面略带油腻感；复元愈肝胶囊各 用药组大鼠肝脏色泽、质地、外观接近正常组；东宝肝泰组大鼠肝脏外观较模型 组改变不明显。 4光镜观察大鼠肝脏病理形态学变化：正常对照组大鼠肝小叶清晰，肝细胞 索排列整齐，偶见小泡性脂滴空泡；模型对照组肝小叶中心带肝细胞中出现大小 不等的脂肪滴，以大泡性脂肪滴为主，一些肝细胞核则被脂肪滴挤得明显偏位， 小叶内及汇管区灶性炎细胞浸润，并伴有一定程度的点片状坏死；复元愈肝胶囊 备剂量组肝小叶和肝血窦结构清晰，细胞内可见少许小泡性脂肪滴；东宝肝泰组 可见较多中、小泡性脂肪滴。 结论 1复元愈肝胶囊有改善肝功能、降低血脂的护肝作用。 2复元愈肝胶囊通过促进Bc卜2表达和抑制Bax表达，阻断脂肪肝大鼠肝细胞 凋亡，而达到治疗脂肪肝的作用。 主题词 脂肪肝 细胞凋亡 基因表达 复元愈肝胶囊 2