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左归丸对衰老大间充质干细胞增殖与分化实验研究
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IIIIIIIIPI IPIIIIPIIII
摘 要 28
Y26231
目的:
在中医学“肾精亏虚”致衰老论及“干细胞具先天之精属性,是先天之精在细胞
层次的存在形式理论的指导下,探讨补肾益精代表方左归丸对衰老大鼠骨髓间充质
干细胞(MsC)增殖与分化的影响。把中医药延缓衰老与干细胞研究相结合,从干细胞
角度研究补肾益精法抗衰老的作用机理。为深入揭示中医药延缓衰老的机制研究提
供创新性的思路,为左归丸应用于临床抗衰老的保健与治疗提供有力的实验依据。
方法:
1、选用3月龄SD大鼠,雌雄各半,通过腹腔注射D一半乳糖造模,制备衰老大
鼠模型。选用补肾益精代表方左归丸水煎剂对模型大鼠灌胃治疗。
2、运用全骨髓贴壁法分离、培养MSC,光镜观察各组大鼠MSC一般形态学特征,
电镜观察各组大鼠MSC的超微结构特点。
3、观察正常组、模型组、左归丸组大鼠MSC细胞形态、生长曲线、生长周期、
B一半乳糖苷酶衰老细胞染色结果,比较各组大鼠MSC增殖能力。
4、观察正常组、模型组、左归丸组大鼠MSC在成骨细胞分化过程中碱性磷酸酶
(ALP)活性的表达及ALP染色阳性细胞率,比较各组大鼠MSC的成骨细胞分化能力。
5、观察正常组、模型组、左归丸组大鼠MSC在成脂细胞分化过程中甘油三酯(TG)
的表达及油红0染色阳性细胞率,比较各组大鼠MSC的成脂细胞分化能力。
结果:
1、模型组P3代大鼠骨髓MSC在光镜下呈现衰老细胞形态学特征,左归丸组大
鼠骨髓MSC的细胞形态与正常组相近。透射电镜观察显示,模型组大鼠P3代骨髓MSC
细胞内结构改变呈现衰老特征,左归丸中剂量组大鼠的骨髓MSC电镜下的超微结构与
正常组最相近。
2、从各组大鼠P3、P5代MSC生长曲线图可发现,模型组MSCOD值明显低于
OD值明显高于模型组(必0.05)。13一半乳糖苷酶衰老细胞
正常组、左归丸组MSC
染色结果显示,模型组衰老细胞阳性率明显高于正常组(K0.05),左归丸可显著降
低衰老细胞的阳性率(尸锄05)。
3、碱性磷酸酶染色,模型组MSC染色阳性率明显低于正常组,左归丸组MSC染
ALP活性值明显低于
色阳性率明显高于模型组(尸现05)。成骨诱导14d模型组MSC
正常组、左归丸组MSCALP活性明显高于模型组(尸现彻。
4、油红0染色,模型组MSC染色阳性率明显高于正常组,左归丸组MsC染色
阳性率明显低于模型组(尸现彻。成脂诱导7d模型组MSCTG表达量明显高于正常
组、左归丸组MSCTG表达量明显低于模型组(尸现∞。
结论:
1、所培养的大鼠干细胞在细胞形态上具备MSC特征。衰老大鼠MSC的细胞形态
各方面表现有明显改变。左归丸能改善衰老细胞的形态学变化。
2、衰老大鼠MSC增殖能力减弱,左归丸能改善衰老大鼠MSC增殖能力。
3、衰老大鼠MSC骨向分化能力降低,脂向分化能力增强。左归丸水煎液一定浓
度时可促进衰老大鼠MSC向成骨细胞分化,同时可抑制其向成脂细胞分化。
关键词: 衰老;左归丸;间充质干细胞:增殖;分化
II
Effects Pi
of i I I onMSCProI i ferati i C
Zuogu on,Osteogen
Di fferenti ati onandAdi i CDi fferenti ati on i Rats
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