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转基因小鼠模型的载体构建和在人肝癌HepG2细胞中的表达
摘要
目的构建转基因小鼠模型的载体，检测载体表达盒的可行性，所携带fat．1
基因在真核细胞(人肝癌HepG2细胞)的表达、以及功能发挥情况(对细胞增殖、
凋亡以及细胞周期中所起的作用)，鉴定出转基因小鼠载体的合适性。
方法将n-3多不饱和脂肪酸脱氢酶基因fat．1的eDNA插入到真核表达载体
A—fat一1，用脂
(pcDNA3．1(+加yc-HisA)中，构建重组表达载体pcDNA3．1(+)myc-His
HepG2细胞周期和细胞凋亡的影响。
A．fat．1，所携带的
结果成功地构建了真核表达载体pcDNA3．1(+)myc．His
mRMA的条带。
fat-1基因能在H印G2细胞内有效异源表达，48h后可检测到fat．1
与对照细胞相比，fat．1基因有效地抑制了人肝癌细胞HepG2细胞的增殖(70％，P
O．01)，促进了凋亡，细胞增殖主要被阻滞在Go／Gl期；同时降低了人肝癌细胞
n-6／n．3
PUFAs比例。这说明fatl基因很好地发挥了功能。
A．fat．1可以作为真核细胞
结论所构建的真核表达载体pcDNA3．1(+)rnyc．His
内表达系统。所携带的fat．1基因功能发挥正常：能降低人肝癌HepG2细胞n．6／11．3
A．fat．1重组载体可以作为下一步转基因小鼠的合适载
增殖。pcDNA3．1(+)myc．His
体。
硕士研究生秦伟伟(生物化学与分子生物学)
指导教师 葛银林教授
关键词： 载体构建；多不饱和脂肪酸；HepG细胞；基因表达
ofVector MiceModeland of
C!onstructionof
Transgenic Expression
vectorinhumanlivercancer cells
HepG2
ABSTRACT
vector
Toconstructvectorof micemodel．testits of
objective transgenic feasibility
cassetteanddetectthe and effecton
function(the
expression expression proliferation,
andcell the carriedfat-1 inthe
of
apoptosiscycle cell)of gene eukaryotecell(human
liver to the
order ofvector．
cancelHepG2 identifysuitability
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