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组织工程肌腱体外构建及相关研究 摘 要 肌腱缺损的修复是整复外科的挑战之一。组织工程技术将是未来临床医学由 替代向重建发展的重要手段。肌腱细胞来源有限，体外培养易老化，而皮肤成纤 维细胞在形态和功能上接近肌腱细胞，两者均起源于原始胚胎中胚层组织，且皮 肤成纤维细胞分布广泛、取材容易，在肌腱损伤修复过程中成纤维细胞又起着重 要的作用。因此，若能以皮肤成纤维细胞作为组织工程化肌腱种子细胞的来源， 可望基本解决组织工程化肌腱种子细胞缺乏的问题。本研究的目的是探讨在体外 应用皮肤成纤维细胞作为种子细胞构建组织工程化肌腱的可行性。 方法： 本研究以人皮肤成纤维细胞为种子细胞，通过对生物相容性和机械强度等指 标的检测，验证国产PGA长纤维用于肌腱组织工程的合理性。并且比较动态牵拉、 静态牵拉和无张力状态下组织工程化肌腱的体外形成情况，探索力学刺激对体外 构建肌腱的影响。为了证明皮肤成纤维细胞成肌腱的潜能，我们比较了分别以人 皮肤成纤维细胞与人肌腱细胞在反应器内构建的组织工程化组织。为了验证体外 构建肌腱的临床应用性，我们还初步尝试了修复猕猴肌腱缺损的体内实验。 结果： 1）国产PGA长纤维具有良好的生物相容性、可塑性和生物力学性能。 2 ）牵拉式生物反应器可以模拟体内的力学环境，提供周期性的牵张力。 3 ）在体外应用牵拉式生物反应器，能够成功构建出具有一定组织结构和生物力 学强度的组织工程化肌腱组织。 4 ）人皮肤成纤维细胞和肌腱细胞构建的组织工程化组织在大体、组织学、透射 电镜和生物力学等多方面均无明显差异。 5 ）猴皮肤成纤维细胞与肌腱细胞构建肌腱在体内短期内（6－8周）均能形成具 有一定结构和力学特性的肌腱组织，但是并不成熟。 结论： 皮肤成纤维细胞可以作为种子细胞，与国产PGA支架在体外牵拉式生物反应 器内构建出肌腱样组织。 关键词： 组织工程 皮肤成纤维细胞 PGA 生物反应器 In vitro Tendon Engineering and Related Research Abstract Treatment of tendon defects is one of the challenges in plastic surgery. With the development of tendon tissue engineering, this technique will provide a new ideal treatment method for tendon defects. There remain some problems when autologous tenocytes are used as seed cells, such as limited cell source and morbidity at donor site. Human dermal fibroblasts and tenocytes are similar in their morphological characteristics and functions, and they are both originated from mesoderm. Additionally, abundant resources are available for dermal fibroblasts to be used as the new seed cells for tendon tissue construction, and thus it may solve the problem of cell source for tendon engineering Moreover, in vitro engineering is consider