实验三细菌的简单染色和革兰氏染色 1.了解细菌的涂片及染色在微生物学实验中的重要性; 2.学会和掌握细菌简单染色和革兰氏染色的基本方法和步骤。 在显微镜下观察微生物样品时,必须将其制成片,这是显微技术中一个重要环节。常用的方法有压滴法、悬滴法和固定等。由于微生物尤其是细菌的细胞小而透明,在普通光学显微镜下与背景的反差小而不易识别,为了增加色差,必须进行染色,以便对各种形态及细胞结构的识别。 1.简单染色 涂片(下图) -固定 -染色 –水洗-干燥-镜检 2. 革兰氏染色 各种细菌经革兰氏染色法染色后,能区分成两大类,一类最终染成紫色,称革兰氏阳性细菌(Grampositive bacteria, G+);另一类被染成红色,称革兰氏阴性细菌(Gram negative bacteria, G-)。其过程如下: 涂片 -固定 -染色(结晶紫) -水洗-碘液媒染-水洗-乙醇脱色-番红复染-水洗-干燥-镜检 五、实验材料、器皿 1.实验材料: 大肠杆菌、枯草杆菌或环境中分离到的未知菌。 2.器皿、试剂: 显微镜、香柏油、二甲苯(无水酒精)、镜头纸等;草酸铵结晶紫染色液、体积百分数95%乙醇、革兰氏碘液、质量浓度5g/L番红染色液等。 六、注意事项 无菌操作是微
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