12-13内膜系统1-36 细胞生物学课件.ppt

易位子的中央孔与核糖体大亚基的中央通道对齐，供多肽链穿入。 SRP和SRP受体都是G蛋白，它们不仅将合成蛋白质的核糖体引导到内质网，而且通过GTP-GDP的交换，将内质网膜中的易位子通道打开，让信号序列与之结合。GTP 水解作为信号序列转运的能量来源。 GTP在蛋白质转运中的作用 （3）膜蛋白的合成★起始转移序列(start-transfer signal)  N端信号肽  内信号肽(internal singnal peptide):位于多肽链内的一段疏水区段，具有与N端信号肽同样的功能，只是不能被信号肽酶切除，从而成为膜蛋白的α-螺旋跨膜结构。★终止转移序列(stop-transfer sequence) 一段由特定氨基酸序列组成的疏水区段，在由信号肽引导的肽链转移过程中，当停止转移肽进入移位子并与其相互作用时，移位子即由活性状态转换为钝化状态而终止肽链的转移，也成为膜蛋白的α-螺旋跨膜序列。 跨膜蛋白有多种插入内质网膜的方式，决定了它们转移到细胞器膜上以及质膜上后膜蛋白分布的不对称性。 内含信号序列首先作为信号序列与SRP一起将核糖体附着到内质网，然后作为起始转移信号与蛋白质转运通道结合引导新生肽的转移。在与转运通道结合过程中，始终保持具有较多正电荷氨基酸的一端朝向胞质溶胶一侧，由于它不能被切除，所以合成的是膜蛋白。 单次跨膜蛋白的形成(一) ER-N端信号肽与终止转移序列共同作用，完成单次跨膜蛋白合成。 单次跨膜蛋白的形成(二) 内含信号序列形成一个跨膜区，停止转移序列也形成一个跨膜区，二者相加就成为二次跨膜蛋白。 二次跨膜蛋白的形成 多次跨膜蛋白的形成 移位子不仅在与膜垂直的方向上存在一个随时可以开关的通道，在另一个方向上，即在脂双层内部也存在一个随时可以开关的通道。膜蛋白上的信号肽打开移位子上的第一个通道之后，肽链以去折叠构象跨膜，直到肽链上的终止转移序列被移位子识别，使移位子的第二个通道打开，正处于通道中的那部分肽链不再跨膜，而是横向转移到脂双层中。转移结束后，移位子的两个通道同时关闭。 包括糖基化；甲基化；羟基化；酰基化；二硫键形成；磷酸化与去磷酸化；辅酶或辅基与酶的共价结合；亚基的聚合；等等。 蛋白质的修饰与加工 2.蛋白质的折叠 与蛋白质折叠相关的分子： 　■谷胱甘肽 　■蛋白二硫键异构酶(PDI) ■分子伴侣(molecular chaperon) （1）蛋白二硫键形成 ? PDI：在肽链中催化错配二硫键断裂并形成正确二硫键连接，最终使蛋白质形成热力学最稳定的天然构象。 ?谷胱甘肽：为链内二硫键形成起着重要作用。 CH2-SH CH2-SH G-SH CH2-S-S-G CH2-SH CH2-S CH2-S + G-s-s-G ２G-SH G-SH 肽链内二硫键形成机制 G-SH:还原性谷胱甘肽 G-S-S-G:氧化性谷胱甘肽 一级结构是蛋白质空间构象和特异生物学功能的基础。 （2）分子伴侣 是细胞一类保守蛋白质，能识别肽链的非天然构象，通过与疏水肽段结合和释放作用(消耗ATP)，消除蛋白质不正确的折叠，促进各功能域和整体蛋白质的正确折叠。大多成员属于热激蛋白或热休克蛋白(HSP)家族，如HSP70、HSP90 。 Hsp70：结合尚未离开核糖体的新生肽链或正在穿膜的肽链，防止肽链疏水段错误聚集，有利于 肽链的正确折叠。 3.蛋白质的糖基化修饰 在糖基转移酶的催化下，单糖或寡聚糖与蛋白质的氨基酸残基共价连接而形成糖蛋白的过程。 糖与蛋白质的连接方式—— N-连接的寡糖蛋白：连接部位在蛋白质的天冬酰胺残基(Asn)的NH2上，发生在RER腔面。 O-连接的寡糖蛋白：发生在高尔基复合体腔面。 糖基磷脂酰肌醇 寡糖分子先以焦磷酸链与多萜醇连接活化 4.蛋白质的运输 核糖体→RER→→高尔基复合体→分泌泡→靶部位或胞吐出胞 转运小泡 转运小泡 5.膜脂的合成 ?合成细胞所需绝大多数膜脂（包括磷脂和胆固醇） 两种例外：鞘磷脂和糖脂(ER开始→高尔基复合体完成)；线粒体/叶绿体某些单一脂类是在它们自己的膜上合成的。 ?磷脂合成酶：ER膜整合蛋白，活性位点朝向胞质面。 ?翻转酶(flippase)与膜脂转位 ?膜脂的转运：膜泡运输、磷脂转移蛋白 乙酰转移酶 磷酸酶 在内质网膜上合成磷脂酰胆碱 翻转酶 示磷脂的两种转运方式 磷脂转移蛋白 运输小泡 出芽 线粒体、叶绿体、过氧化物酶体等细胞器膜中的脂就是