缓冲溶液精要.pptVIP

血浆中的碳酸缓冲系pH的计算方程式为： 正常人血浆中[HCO3-]和[CO2]溶解 的浓度分别为0.024mol·L-1和0.0012mol·L-1，代入上式 在体内,HCO3-是血浆中含量最多的抗酸成分, 所以将血浆中的HCO3-称为碱储。 正常血浆中HCO3--CO2(溶解)缓冲系的缓冲比 为20:1,已超出体外缓冲溶液有效缓冲比(即10:1～1:10)的范围，该缓冲系的缓冲能力应该很小。而事实上，在血液中它们的缓冲能力是很强的。 这是因为体内是一个“敞开系统”，当血浆中有过多的酸、碱引入，HCO3-或CO2(溶解)的浓度改变可由呼吸作用和肾的生理功能获得补充或调节，使得血液中的HCO3-和CO2(溶解)的浓度保持相对稳定(20:1)。 当血液中[H＋]增加时，H＋＋HCO3－ CO2（溶解）(增加) 肺 加快呼吸速度排除CO2 HCO3-(减少) 肾 延长HCO3-停留时间(或回吸收) 血液中碳酸缓冲系与肺和肾的的调节关系可 用下式表示： 当血液中[OH-]增加时， OH－＋H2CO3 CO2（溶解）(减少) 肺 降低CO2排出量 HCO3-(增加) 肾 增加HCO3－的排泄 如果由于某些疾病使代谢发生障碍，体内聚积过多的酸或碱，就可能出现酸中毒和碱中毒症状。临床上常用乳酸钠治疗酸中毒，用氯化铵矫正碱中毒。 含0.05%吐温－20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS－T)配制方法为： 　　称取磷酸二氢钾(KH2PO4)，磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)，氯化钠(NaCl)，氯化钾(KCl)，吐温－20 ，加水。 PBS缓冲液 封闭剂应该封闭所有未结合位点而不替换膜上的靶蛋白、不结合靶蛋白的标委、也不与抗体或检测试剂有交叉反应。Tween-20有复性抗原的作用，可提高特异性的识别能力。在做westen blot时，用惰性蛋白质或非离子去污剂封闭膜上的未结合位点，可以降低抗体的非特异性结合。最常见的封闭剂是BSA、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶和Tween-20（0.05 – 0.1%）稀溶液。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 一、缓冲容量 (buffer capacity) 缓冲容量：在数值上等于使单位体积(1L或1ml)的缓冲溶液的pH值改变一个单位时，所需外加一元强酸或一元强碱的物质的量(mol或mmol)。 用微分式表示为： 式中：V 是缓冲溶液的体积，单位为L或ml； dna(b) 是缓冲溶液中加入一元强酸(dna)或一元强碱(dnb)的物质的量，单位是mol或mmol； 为缓冲溶液pH值的改变量。 由上式可知： 1.β值均为正值。 2.β值愈大，缓冲能力愈强。 由式可导出缓冲容量β与缓冲溶液[B-]、[HB]及总浓度(c总=[B-]+[HB])的关系* ： β＝2.303×[B-][HB]/c总 在100ml, pH=4.73的缓冲溶液中,加入0.003molNaOH,缓冲溶液的pH值变为4.78，求此缓冲溶液的缓冲容量。 解： ΔpH=4.78-4.73=0.05 Δn=3/100=0.03 example 编号 缓冲比 加NaOH后的 c总 [Ac-]/[HAc] pH pH △pH β 1 2 3 4 0.2 1:1 4.75 4.76 0.01 0.1 0.02 1:1 4.75 4.83 0.08 0.013 0.2 1:9 3.80 3.83 0.03 0.034 0.2 9:1 5.70 5.72 0.02 0.05 二、影响缓冲容量β的因素* 向50.0mL总浓度为0.2mol·L-1 HAc-Ac-的缓冲溶液中，加入0.05mL 1.0mol·L-1的NaOH溶液，根据不同缓冲比时，各溶液pH的变化情况，可算出相应的