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第四章核酸序列2资料.ppt
5 GAATTC 3 3 CTTAAG 5 限制性核酸内切酶是基因克隆中常用的工具酶。 基因克隆是指在体外将目的基因同能够自我复制的载体DNA连接,然后将其转入宿主细胞或受体生物,进行表达或进一步研究的分子操作的过程,又称分子克隆或重组DNA技术。 基因克隆 基因克隆的步骤.f4v 常规分析 比对分析 基因结构识别 4.1.1 核酸序列的检索4.1.2 核酸序列组分分析4.1.3 序列变换4.1.4 限制性酶切分析 4.1.1 核酸序列的检索 4.1.2 核酸序列组分分析 1. 载入序列 常用软件:BioEdit、DNAMAN 双击打开文件 单击选中文件 2. 输出结果 序列组分显示结果 核苷酸组成的直方图 4.1.3 序列变换 常用软件:SeqQCDemo、DNASTAR、DNAMAN 反向 反向互补 4.1.4 限制性酶切分析 限制性核酸内切酶(restriction endonuclease):识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。 限制性核酸内切酶其识别的序列大多数为回文对称结构(结构相同,方向相反的序列),切割位点在DNA两条链相对称的位置。 EcoRⅠ酶切位点 平末端 5 突出粘性末端 3 突出粘性末端 pcDNA.3.1TM/myc-His(-),A质粒 pcDNA.3.1TM/myc-His(-),A 多克隆位点 1. 载入序列 DNAMAN 、 SeqQCDemo、BioEdit 限制性酶切分析的常用软件 DNAMAN载入序列界面 * *
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