微囊藻水华对湖泊重金属形态含量及其微生物群落结构的影响的研究.pdf

目录 目录 摘要……………………………………………………．．I Abstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．II 第一章绪论…………………………………………………1 1．1研究背景……………………………………………．1 1．1．1蓝藻水华………………………………………．1 1．1．2痕量金属的地球化学循环…………………………．．1 1．1．3痕量金属污染现状…………………一……………2 1．1．4浅水湖泊金属污染水体和沉积物微生物的群落结构变化……3 1．2重金属地球化学循环及其生物有效性的研究方法………………3 1．2．1BCR法提取不同形态重金属…………………………．3 1．2．2 ICP—MS测定金属形态………………………………4 1．2．3微生物群落研究的分子生态学方法……………………4 1．2．4本研究主要采用的分子生物学方法……………………9 1．2．5本研究的主要内容、技术路线………………………．9 第二章微囊藻水华消亡对水体及沉积物中重金属形态含量及微生物T-RFLP的 分析……．………………………………………………．13 2．1前言………………………………………………．13 2．2材料与方法…………………………………………．13 2．2．1采样点样品的采集………………………………．．13 2．2．2 BCR法提取沉积物中不同形态金属。…………………．14 2．2．3ICP-MS测定重金属含量…………………………．．14 2．2．4水样中细菌基因组DNA的提取………………………．16 2．2．5沉积物中细菌基因组DNA的提取……………………．17 2．2．6 T-RFLP分析……………………………………．17 2．．2．7 T-RFLP数据分析处理……………………………．20 2。2。8细菌种群组成及变化的参数…………………………20 2．2．9细菌群落结构相似性分析…………………………．21 2．3结果与分析…………………………………………．21 2．3．1微宇宙体系水体及重金属理化指标的变化……………．．21 2．3．1微宇宙体系微生物群落结构T-RFLP分析………………28 2．3．3微宇宙体系细菌群落结构多样性指数分析……………．．33 2．4小结………………………………………………．36 第三章构建克隆文库研究微宇宙体系细菌群落结构的变化……………37 3．1前言………………………………………………．37 3．2材料与方法…………………………………………．37 3．2．1克隆文库所需片段的准备…………………………．37 3．2．2克隆建库和测序…………………………………．38 3．2．3测序结果的处理和分析……………………………39 3．3实验结果……………………………………………40 3．3．1克隆文库的构建和阳性克隆的筛选…………………．．40 3．3．2测序结果与已知序列的对比结果……………………．40 3．3．3克隆文库与T-RFLP方法分析结果的比较………………46 3．4小结………………………………………………．46 目录 第四章结论与展望…………………………………………．48 4．1研究的结论…………………………………………．48 4．2本研究的创新之处……………………………………．48 4．3研究展望……………………………………………49 参考文献…………………………………………………．50 参与课题和发表论文…………………………………………53 致{射……………………………………………………．．54