小鼠慢性酒精中脑神经细胞app和aβ蛋白的表达.pdfVIP

·中文论著摘要· 小鼠慢性酒精中毒脑神经细胞APP和AB蛋白的表达 刖 舌 我国是一个人口大国，而且是一个老龄化进程最快、老龄人口众多的国家。 我国又是一个具有悠久历史、多种多样酒文化并存的国家。由于特殊的社会和历 史原因，酒精中毒的情况经常发生。 慢性酒精中毒(chromcalcoholism)是以对乙醇的成瘾为特征，由于经常反复 饮酒对乙醇产生耐受，当其戒酒时出现脱瘾(withdrawal)的神经症候。慢性酒精 中毒引起神经系统及其他器官的严重损害，其中神经系统的损害最为严重。在法 医学实践中，有时会遇到酒精中毒的案例，常与交通事故、重要器官组织功能障 碍等有关。 阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease，AD)是一种渐进性的神经变性性疾病， 表现为全面的认知功能障碍。主要病理学改变是由来源于淀粉样前体蛋白 (amyloid 13)构成 precursor 的淀粉样斑块和过度或异常磷酸化的Tau蛋白构成的神经纤维缠结。 阿尔茨海默病的发病受很多因素影响，包括环境因素、不良饮食习惯、药物 种类、中毒等。慢性酒精中毒是否会导致脑内APP和A13蛋白的增多从而引发阿尔 茨海默病的发生，目前尚缺乏系统的理论和实验研究。 enolase，NSE)是神经细胞的标 神经细胞特异性烯醇化酶(Neuron-specific 志性蛋白，特异性的存在于神经元和神经内分泌细胞中，占脑内全部可溶性蛋白 的1．5％，神经元损伤或坏死后NSE进入血液。 本研究在建立小鼠慢性酒精中毒的动物模型基础上，应用组织病理学和免疫 13的表达， 组织化学等技术，研究小鼠慢性酒精中毒后，脑组织神经细胞中APP和A 并应用SPSS统计软件对观察到的实验结果进行统计学分析，探讨慢性酒精中毒脑 神经细胞中APP和A13的含量变化以及与阿尔茨海默病发病之间的因果关系。 材料和方法 一、动物模型的建立及分组 雄性健康9周龄昆明小鼠42只，随机分为30天组，60天组，每组又分10％酒精 组、20％酒精组和对照组，其中对照组各5只，10％酒精组各8只，20％酒精组各8 只。 实验组将无水乙醇(色谱纯)用饮用矿泉水配成浓度为10％、20％酒精溶液作 为实验小鼠饮用水，对照组采用饮用矿泉水代替。实验结束后，直接断头处死动 物，迅速提取小鼠脑组织，4％多聚甲醛／PBS pH7．4固定液固定，石蜡包埋、制片。 二、实验方法 (1)应用HE染色法观察小鼠慢性酒精中毒后脑神经细胞的病理组织学形态 变化； (2)应用免疫组织化学染色法观察小鼠慢性酒精中毒后脑神经细胞内神经元 特异性烯醇化酶表达的变化； (3)应用免疫组织化学染色法观察小鼠慢性酒精中毒后脑神经细胞内APP 和A13表达情况； Advanced (4)采用Motic 3．2图像分析系统计算免疫组织化学染色阳 Images 性细胞数和细胞内阳性反应产物的光密度； (5)应用SPSS统计学软件对实验数据进行统计分析。 实验结果 (1)各实验组小鼠出现明显的慢性中毒表现，且体重明显下降； (2)HE染色见慢性酒精中毒的小鼠脑组织水肿，神经细胞内尼氏体消失或 边聚，神经细胞周围间隙增宽； (3)神经元特异性烯醇化酶免疫组织化学染色见该酶蛋白含量增加； (4)对照组可见少量APP免疫组织化学染色阳性的神经细胞，染色产物分 布于细胞胞浆内，呈棕黄色。实验组APP染色阳性细胞明显增多，表达增强，且 不同浓度不同时问段阳性表达强度不同。实验组脑神经细胞胞浆内出现明显的A B阳性染色产物，且高浓度长时间给药组阳性细胞数明显增多，表达增强。使用