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中华人民共和国国家标准 GB 5413.16—2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中叶酸（叶酸盐活性） 的测定 National food safety standard Determination of folic acid (folate activity) in foods for infants and young children, milk and milk products 2010-03-26 发布 2010-06-01 实施 中华人民共和国卫生部 发布 GB 5413.16—2010 前 言 本标准代替 GB/T 5413.16-1997 《婴幼儿配方食品和乳粉叶酸（叶酸盐活性）测定》。 本标准与GB/T 5413.16-1997相比，主要变化如下： ——对磷酸盐缓冲液作了调整； ——增加了米粉的处理方法； ——增加了光密度法测定步骤。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： ——GB 5413-1985 、GB/T 5413.16-1997 。 I GB 5413.16—2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中叶酸（叶酸盐活性）的测定 1 范围 本标准规定了婴幼儿食品和乳品中叶酸（叶酸盐活性）的测定方法。 本标准适用于婴幼儿食品和乳品中叶酸（叶酸盐活性）的测定。 2 规范性引用文件 本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本 适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。 3 原理 利用干酪乳杆菌（Lactobacillus casei ）ATCC 7469 对叶酸的特异性，在含有叶酸的样品中生长产生 的酸度和形成的光密度来测定叶酸的含量。 4 试剂和材料 除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的二级水。 4.1 鸡胰腺：称取 100 mg 干燥的鸡胰腺，加 20 mL 蒸馏水，搅拌 15 min，离心 10 min （3000 转/分钟）， 取上清液，临用前配制。 4.2 0.9 %生理盐水：称取 9.0 g 氯化钠溶解于 1000 mL 水中，分装于具塞试管中，每管 10 mL，121℃ 灭菌 15 min。每周准备一次。 4.3 磷酸盐缓冲液 4.3.1 磷酸盐缓冲液 Ⅰ（0.05 mol/L ）：称取5.85 g 磷酸二氢钾，1.22 g 磷酸氢二钾，用 1000 mL 水溶 解。临用前按 0.5 g/100 mL 加入抗坏血酸。 4.3.2 磷酸盐缓冲液 Ⅱ（用于谷物及谷物制品前处理）：称取14.2 g 磷酸氢二钠，用 1000 mL 水溶解。 临用前按 1.0 g/100 mL 加入抗坏血酸，用氢氧化钠溶液 A （4.16 ）调pH 至 7.8±0.1 。 4.3.3 磷酸盐缓冲液 III （用于谷物及谷物制品测试）：称取14.2 g 磷酸氢二钠，用 1000 mL 水溶解。 临用前按 1.0 g/100 mL 加入抗坏血酸，用氢氧化钠溶液 A （4.16 ）调pH 至 6.8±0.1 。 4.3.4 磷酸盐缓冲液Ⅳ （0.1 mol/L ）