中药化学总论四节教案.ppt

盐析法: ① 定义：根据有效成分的性质（在水中溶解度不是很大），向水提液中加入无机盐，使达到一定的浓度或饱和，促使有效成分在水中溶解度降低而沉淀析出，与水溶性较大的杂质分离的方法。 ② 常用无机盐：NaCl、Na2SO4、（NH4）2SO4....... ③ e.g 黄藤 1%HAc 1%HAc提取液 NaCl、OH- 巴马丁 三七 水提液 MgSO4 沉淀（三七皂苷乙） 两相溶剂萃取法（液-液萃取法） ① 定义：利用各种化合物在互不相溶的二相溶剂中“分配系数”的不同而分离的方法。各化合物在二相中分配系数差异越大，则分离效果愈好。 ② 应用：一般从中药水提液中以有机溶剂萃取。 C6H6、Et2O、CHCl3——苷元、低极性苷 EtOAc、n-BuOH——皂苷、黄酮苷、多元酚 酸性成分——调酸后 CHCl3、EtOAc、n-BuOH等萃取 再加OH- 水相、有机相反复处理。 碱性成分——调碱后 CHCl3、EtOAc、n-BuOH等萃取 再加H+ 水相、有机相反复处理。 ③ 注意： a、萃取次数：3~5次，有时5~10次 b、萃取是否完全：以TLC、PC或试管反应检验 c、调酸碱萃取：注意始终保持PH不变，也可用缓冲溶液代替水液 d、反复调酸碱：常用盐酸，无氧化性 （与硫酸、硝酸比） 氨水，碱性温和，可与盐酸生成NH4Cl e、乳化的消除：放置（时时转动或搅动） 离心（2000~4000转/min） 加热或冷置 例 从某中药中分离到A、B、C三种生物碱类化合物，用不同pH缓冲纸层析，色谱图如下图所示。展开剂为氯仿，上行展开。试问： 三个化合物的碱性强弱顺序如何？ 三个化合物中是否有两性生物碱？ 请设计一个合理的工艺流程图将A、B、C三种生物碱的混合物分离。 实例， 粉防己中汉防己甲、乙素的分离 汉防己甲素 R = CH3 汉防己乙素 R = H 洗脱液的选择：  可选用不同浓度的MeOH、EtOH、Me2CO， 流速0.5~5ml/cm/min。 非极性大孔树脂 ——洗脱剂极性越小，洗脱能力越强。 中极性大孔树脂 ——用极性较大有机溶剂。 双重层析性能： 氢键 + 极性吸附 既有酰胺基，又有非极性脂肪链 如 黄酮苷(A)、相应的黄酮苷元(B) 含水溶剂洗脱（含水醇）： A B（水中氢键牢固，且对苷溶解性大） 非水溶剂洗脱（如CHCl3-MeOH）： B A （极性吸附原理） 加样：20 ~30% 样品水液 样品：聚酰胺 = 1：40 ~ 60 a、除杂，样品量可大大增加 b、样品不溶于水，可用少量醇溶后，拌入少量聚酰胺粉，挥去溶剂，悬浮于洗脱剂中上样 3) 洗脱： 水 递增乙醇浓度 氯仿 氯仿-甲醇 递增甲醇浓度 稀氨水或稀甲酰胺溶液洗脱 洗脱剂：水、酸、碱、盐溶液；参考TLC条件 氯仿/甲醇、水/乙醇 水溶性强的大分子——水、电解质（盐类或缓冲液） 水溶性较差的大分子——醇-水、丙酮-水系统 亲脂性的（Sephadex LH-20）——醇-Me2CO-CHCl3系统，分部收集 一般化合物——PC、TLC 蛋白质、多肽、多糖——在UV特定波长检测，相同流份合并 再生与保存： 短期不用：水洗→含水醇洗→醇→醇中贮藏 长期不用：同上→抽干→乙醚抽干→干燥保存 （6）浓缩与干燥（多为水液） 60~80℃薄膜或旋转蒸发浓缩 多糖可浓缩后加醇沉淀 热不稳定化合物（蛋白质、多肽、酶），冷冻干燥。 （7）凝胶的再生 一般用洗脱剂洗至平衡即可。 有污染（有色）——0.2N NaOH与0.5N NaCl浸泡、水洗净，洗脱剂洗平衡即可。 原理: 非极性吸附 化合物极性