工业微生物筛选资料.pptVIP

(二)间接方法 筛选医用抗生素，可用细茵、真菌、病毒或肿瘤模型，寻找抗细菌、抗真菌、抗病毒、抗肿瘤抗生素、酶抑制剂、免疫制剂等有效物质。 在预筛选时，多用琼脂平扳扩散抑菌法。通过预筛选，直接测定最初分离物的生物活性，能加速筛选过程。 五、检测系统 筛选过程的成功依赖于排除那些已知的或并非需要的代谢产物的检验方法，这样才能识别出人们需要的化合物。 六、性能签别 性能鉴别是分离和筛选微生物代谢产物中最基础的工作。 鉴别可分为两方面： 一是对微生物方面进行形态、培养、生化功能做试验观察，并确定微生物产生菌的类群； 二是从化学的早期鉴别来鉴别微生物的代谢产物。化学的早期鉴别一般对产生菌所产生的代谢产物进行纸上层析、薄板层析、纸上电泳、抗菌谱、高压电泳、紫外分光光度法、液相和气相色谱等试验，并获得各种图谱，与已知图谱进行比较鉴别。 如果认为是有实用前途的代谢产物，则要进一步大量培养，并进行动物试验、毒性考查、药物代谢等实验，并进行提高发酵水平和改善提取工艺的工作，以备投入生产。 如果是新的代谢产物．一般要进一步确定其化学结构，井在此基础上进行合成法的研究或进行化学改造，研究结构与生物活性的相互关系，并对作用机制、生物合成过程作进一步的研究。 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 * 第5章 工业微生物筛选 引言 工业菌种的育种方针 工业菌种的育种： 是运用遗传学原理和技术对某个用于特定生物技术目的的菌株进行的多方位的改造。通过改造，可使现存的优良性状强化，或去除不良性质或增加新的性状。 育种过程 包括下列3个步骤： (1)在不影响菌种活力的前提下，有益基因型的引入。 (2)有益基因型的选出。 (3)改良菌种的评价(包括实验规模和工业生产规模)。 选择育种方法时综合考虑的因素 (1)待改良性状的本质及与发酵工艺的关系(如批式或连续发酵试验)； (2)对这一特定菌种的遗传和生物化学方面认识的明了程度； (3)经济费用。 如果对特定菌种的基本性状及其工艺知晓甚少，则多半采用随机诱变、筛选及选育等技术： 如果对其遗传及生物化学方面的性状已有较深的认识，则可选择基因重组等手段进行定向育种。 工业菌种改良方法 (1)解除或绕过代谢途径中的限速步骤：通过增加特定基因的拷贝数或增加相应基因的表达能力来提高限速酶的含量；在代谢途径中引伸出新的代谢步骤，由此提供一个旁路代谢途径。 (2)改变代谢途径，减少无用副产品的生成以及提高菌种对高浓度的有潜在毒性的底物、前体或产品的耐受力。 (3)抑制或消除产品分解酶。 (4)改进菌种外泌产品的能力。 (5)消除代谢产品的反馈抑制。如诱导代谢产品的结构类似物抗性。 提高特定基因的表达水平 (1)引入强转录及翻译信号，可通过在一高效表达载体上克隆靶基因；在靶基因的上游引入强启动子；修改现有表达信号，提高基因效力等。 (2)诱导解除基因表达抑制的突变。 ？？工业微生物菌种的来源？？ 最初的来源：自然界 实际工作中的来源 工业微生物的来源 1、菌种保藏机构 2、从自然界分离 3、发酵制品中分离 工业微生物分离筛选流程P73 调查—设计方案—采样—富集培养—纯种分离—原种—筛选-- 性能鉴定—菌种保藏 第一节 采样 一、从土壤中采样 1、土壤是微生物生活的大本营，是寻找和发现有重要应用潜力的微生物的主要菌源。不同土样各类微生物数量不同．一般土壤中细菌数量最多，其次为放线菌和霉菌。一般在较干燥、偏碱性、有机质丰富的土壤中放线菌数量较多；酵母菌在一般土壤中的数量较少，而在水果表皮、葡萄园、果园土中数量多些。 2、采样方法 选定采土地点后，铲去表土层2—3cm，取5—25 cm深层土壤10g，装入已灭过菌的牛皮袋内，封好袋口，并记录取样地点、环境及日期。土样采集后应及时分离，凡不能立即分离的样品，应保存在低温、干燥条件下，尽量减少其中菌相的变化 3、注意事项P74 (1)土壤有机质和通气状况 (2)土壤酸碱度和植被情况 (3)地理条件 (4)季节 二、根据微生物生理特点采样 1、原则：根据不同微生物独特的生理特点到相应的生态环境中采样。 2、举例：C源，N源，氧气，温度，渗透压 三、特殊环境下的采样 1、局部条件 2、极端条件 第二节 富集培养 1、富集培养是根据目的微生物的生理特点， 控制营养和培养条件等，设计一种选择性培养