原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
ImageScanner图像扫描系统 20 ′ 20 cm in 40 sec (at 300 dpi) Transmission and reflection mode 0.00 to 3.4 O.D. Scan color selection 14 bits / pixel (grey) Linked to ImageMaster Typhoon Multi-color fluorescence Phosphor-imaging Chemiluminescence （2）2-DE胶图象分析 蛋白质点数统计、蛋白点定位、编号和相对丰度分析等。 主要图象分析软件有： melanie II 3, 4 PDQuest 7.0, ImageMaster 2D Elite 3.10 Phoretix 2D. 2-DE Image Analysis: Image documentation Spot detection Background subtraction pI/Mw calibration Spot normalization (归一化) Gel matching （匹配） Statistics analysis A.蛋白质点检测 对每一个象素点构建一个算子operator.根据光密度检测出完整蛋白质点。 手动执行:spot detection wizard 自动执行:initialise B.背景消减 C.归一化处理 相对定量，便于不同胶的比较。 D.蛋白质点匹配 E.结果输出 IPG 3-10L SDSPLA-801-D、C株细胞蛋白通过在pH3-10L宽pH范围内进行二维电泳所得的凝胶图谱。在pH3-10L和Mr14，000-97，400Da范围内利用PDQUEST软件分析图象。（A）选取的是PLA-801-C株蛋白的扫描图，（B）为经图象加工、背景消除的图象。PLA-801-D的图象数据此处未示。 Report Silver staining gel Spot detect Matching Differential map Normalization ImageMaster 凝胶图象分析流程图 ImageMaster Version 3.0 Spot Detection wizard Accurate spot detection ImageMaster Version 3.0 Background removal using different methods. ImageMaster Version 3.0 Getting Spot volume is as easy as clicking on a spot, the corresponding row is highlighted in the table. Clicking on a row, highlights and centers the spot in the image window. Histograms are available for each spot. 分析软件ImageMaster 2D Elite 3.10 ImageMaster 2D Database Query with 2D Database Primary Passage 20 Passage 35 BEP2D细胞蛋白质2D图谱差异点比较 S U T 2-D蛋白斑点药物作用时间（h) 0 2 6 12 24 W A、C、d、D分别对应2-D电泳图上相应的蛋白质点 1-DE Image Analysis 蛋白质含量（纯度）信息 蛋白质pI/Mw分析 SDSof SARS proteins Mw: 30Kd Mass: 2 ug 94,000 67,000 43,000 20,100 14,400 1-D Analysis 1-D Analysis 2、二维电泳蛋白质数据库 Appel等1996（Electrophoresis, 17: 540-546）提出网上联合数据库规范： （1）可远程关键词检索 （2）可与其他数据库连接 （3）可连接不同交叉参考数据库目录 （4）点击胶上蛋白点可调出单个蛋白相关信息 （5）可进入联合电泳数据库 瑞士生物信息研究所 WORLD-2DPAGE网子站 可连接30多种2D数据库。 思考题： 分步提取的原理与方法 简述从样品制备到数据库检 索的主要技术环节 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中
文档评论（0）