基因工程(ali)资料.pptVIP

人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 * * * 基因工程 专题1 考点1　基因工程的理论基础 　　1.基因拼接的理论基础 2.外源基因表达的理论基础 3.技术支持： 基因转移载体的发现；工具酶的发明； DNA体外重组的实现；重组DNA表达实验的成功。 重难点聚焦 （1）DNA双螺旋结构　 （2）DNA的基本组成单位都是四种脱氧核糖核苷酸,遵循 碱基互补配对原则 　　 （1）遗传信息的传递都遵循中心法则 （2）生物界共用一套遗传密码 考点2　基因工程的工具 1.“分子手术刀”—— （1）来源：主要是从 中分离纯化出来的。这种酶在原核生物中的作用是防止外来病原物的侵害，将外源DNA切割保证自身安全。 （2）作用特点（两个特定） 　专一性： 限制性核酸内切酶（限制酶） 原核生物 能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 （3）作用结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式—— 黏性末端：错位切，切下后的两端形成一种回文式 　　　　　的单链末端 平末端：平切，在两条链的特定序列的相同部位切割， 　　　　形成一个无黏性末端的平口 （4）作用实质：使特定部位的两个脱氧核苷酸之间的 断开。 黏性末端和平末端 磷酸二酯键 DNA连接酶 　 (1)类型： ①相同点： ②区别： E·coli DNA连接酶 T4DNA连接酶 来源：T4噬菌体 作用：既能连接黏性末端，也能 连接平末端，但后者效率低 来源：大肠杆菌 作用：使黏性末端之间连接 都缝合磷酸二酯键 有两种DNA连接酶，E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶 2.“分子缝合针”—— 　　(2)与DNA聚合酶作用的比较 DNA连接酶 DNA聚合酶 作用实质 是否需要模板 连接DNA链 作用过程 作用结果 都是催化两个核苷酸之间形成磷酸二酯键 不需要 需要 双链 单链 将单个核苷酸加到已存在的核酸片段上，形成磷酸二酯键 将存在的DNA片段连接成重组DNA分子 在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键 合成新的DNA分子 　　　　 （1）作用：①作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞内。 　　 ②利用载体在宿主细胞内对目的基因大量复制。 （2）具备的条件： 　　 （3）种类： 　　①最常用的载体是 　　特点： ②其他载体： 载体 ①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 质粒 它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌核DVA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子 3.“分子运输车”—— λ噬菌体的衍生物、动植物病毒 1、关于限制酶的说法中，正确的是（ ） A、限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序列 B、EcoRI切割的是G—A之间的氢键 C．限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNA D．限制酶只存在于原核生物中 课堂巩固 C 2、基因工程的载体，必须具备的条件及理由是 ( ) A、能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量 复制，以便提供大量的目的基因 B、具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达 C．具有某些标记基因，以便为目的基因的表达 提供条件 D、能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便于 进行筛选 A 3、已知标记基因有抗四环素和抗氨苄青霉素,现探讨某质粒中有无标记基因或标记基因是什么?根据实验结果得出相应的结论。 对照组：不加抗 生素 实验组1：加四环素 实验组2：加氨苄 青霉素 实验组3： 加四环素和 氨苄青霉素 对照组 实验组1 实验组2 实验组3 结 论 预期一 + + + + 预期二 + + - - 预期三 + - + - 预期四 + - - - 既含有抗四环素基因也含有抗氨苄青霉素基因 只含有抗四环素基因 只含有抗氨苄青霉素基因 既不含有抗四环素基因也 不含有抗氨苄青霉素基因 “+”“-”分别表示有无细菌生长 考点3　基因工程的基本操作程序 　　1.目的基因的获取 　　 (1）直接分离基因： 　　 （2）人工合成的方法：目前人工合成基因的方法主要有两条途径。 ①逆转录法： ②化学方法人工合成： （3）