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模拟移动床（SMB） 每个区由若干个色谱柱组成，Ⅰ区在洗脱剂（Desorbent）与萃取液（Extract）间，从固相解吸出强吸附组分（Slow Moving Solutes）并使固相吸附剂再生；Ⅱ区在萃取液和进料液（Feed）间，是弱吸附组分（Fast Moving Solutes）的解吸区；Ⅲ区在进料液与萃余液（Raffinate）间，固相吸附强吸附组分；Ⅳ区在萃余液与洗脱液间，固相吸附弱组分，再生洗脱液。  洗脱方式 离子交换完成后，将树脂吸附的物质重新转入溶液的方法 洗脱方法 （1）改变溶液pH值 （2）改变溶液离子强度 树脂再生 是指使离子交换树脂重新具有交换能力的过程 酸性阳离子树脂 酸-碱-酸-缓冲溶液淋洗 碱性阴离子树脂 碱-酸-碱-缓冲溶液淋洗 方式有：顺流再生和逆流再生 再生方式 顺流再生 优点： 工艺简单； 操作方便、可靠。 缺点： 有重复交换现象，再生剂用量高；工作交换容量低。 再生方式 逆顺流再生 优点： 避免重复交换；再生剂用量少。 树脂底层再生干净，工作 交换容量较高。 缺点： 设备较复杂。 要求控制技术高。 离子交换应用实例 离子交换法提取蛋白质 较无机离子的离子交换平衡复杂，其吸附行为与离子间的静电引力、氢键、疏水作用以及范德华力有关 蛋白质是生物大分子物质，因此，其扩散行为也较无机离子复杂 NH3 R COOH + NH3 R COO + - R NH2 COO - Low pH Positive charge （正电荷） High pH Negative charge （负电荷） Hydrogen gained Hydrogen lost pH 对蛋白质电性的影响 - + Overall charge on protein NH3 R COOH + NH3 R COO + - R NH2 COO - acid isoelectric point alkaline excess positive charge balanced positive and negative charge excess negative charge pH 3 10 滴定曲线 Ixv _2 JB 980910 20 Charge on protein - + pH 3 10 阴离子交换树脂 阳离子交换树脂 pH对树脂分离选择性的影响 蛋白质离子交换分离的基本步骤 平衡 上样吸附 洗脱 再生 + + + + + + - - - - - - - 阴离子交换床层 平衡 样品吸附 - - - - - - - - - - - + + + + + + - - - - 洗脱 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + + + + + + + - - 再生 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + 吸附 洗脱 平衡 再生 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + - - - - - - - - - - - 常用于蛋白质提取分离的离子交换剂 要求：良好的亲水性、具有较大的均匀网格结构、粒度越小分辨率越高 种类：多糖类 离子交换纤维素 交联葡聚糖 交联琼脂糖 聚乙烯醇类 Mono系列 Amersham Pharmacia 本章作业 P223 第一题，第二题 影响吸附的主要因素？ 亲和吸附的原理和特点是什么？ 常用的离子交换树脂类型有哪些？ 影响离子交换速度的因素有哪些？ 用于蛋白质提取分离的离子交换剂有哪些特殊要求，主要有哪几类