酶工程整理简洁技术报告.docVIP

  1. 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
  2. 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  3. 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
  4. 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
  5. 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们
  6. 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
  7. 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
第一章 酶活性调解调解主要指哪些方面。 1.酶浓度的调节(主要有两种方式):1)诱导或抑制酶的合成。例如,(-半乳糖苷酶受乳糖的诱导而合成。2)调节酶的降解 2.激素调节:也和生物合成有关,但调节方式有所不同。例如,乳糖合成酶由催化亚基和修饰亚基构成,其中修饰亚基的水平由激素控制。 3.共价修饰调节:此种调节方式本身又是通过酶催化进行的。例如,磷酸化酶的磷酸化和去磷酸化。 4.限制性蛋白水解作用与酶活力调控:这是一种高特异性的共价修饰调节系统。细胞内合成的新生肽大都以无活性的前体形式存在,生理需要时才通过限制性水解作用激活,实现各种生理功能,如酶原激活、血液凝固、补体激活等。 5.抑制剂的调节:酶的活性受大分子或小分子抑制剂抑制,影响其活力。例如,胰脏的胰蛋白酶抑制剂(抑肽酶);2,3-二磷酸甘油酸是磷酸变位酶的抑制剂。 6.反馈调节:许多小分子物质能够抑制其生物合成途径中催化第一步反应的酶的活性,这种对自身合成的抑制称为反馈抑制。这在生物合成中是常见的现象。例如,异亮氨酸可抑制苏氨酸脱氢酶的活性。 7.金属离子和其他小分子化合物的调节:许多酶需要不同金属离子如K+、Na+、Ca2+、Zn2+、Mg2+、Mn2+等活化。故这些离子的浓度变化会影响有关的酶活力。其他小分子化合物,如ATP浓度的升高将抑制和ATP再生有关的酶的活性(如磷酸已糖激酶、丙酮酸脱氢酶和柠檬酸合成酶等);而使另一类和利用ATP有关的酶活性提高(天门冬氨酸激酶、磷酸核糖焦磷酸合成酶等)。 分别举例说明酶的绝对专一性和相对专一性。 1.绝对专一性:一种酶只能催化一种物质进行一种反应; 酶对底物的立体异构体具有高度选择能力,这种绝对专一性称为立体异构专一性。例如,乳酸脱氢酶催化丙酮酸生成L-乳酸;而D-乳酸脱氢酶却只能催化丙酮酸生成D-乳酸 2.相对专一性 一种酶能够催化一类结构相似的物质进行某种相同类型的反应。例如,醇脱氢酶作用于伯醇或仲醇,进行脱氢反应,生成醛或酮。 酶活力是如何定义的?有哪两类测定方法? 酶活力:一定条件下,酶所催化的反应速度(单位时间内底物的减少量或产物的增加量)。 测定方法:1)取样法:在一定时间间隔内,从反应系统中取出一定量反应液,并采用适当方法求得底物或产物的变化量。 常用具体测定方法:化学法、放射化学法等 2)连续法:在反应过程中对反应系统进行底物或产物变化的直接、连续观测。此法准确性及测定效率较高。常用具体测定方法:光学法(光吸收法、荧光法等)、电化学测定法(离子电极法、氧电极法、电位测定法等)、酶偶联分析法等。 酶蛋白的组成 酶的组成:大部分酶为复合蛋白质,称为全酶(酶蛋白+辅因子)。 酶蛋白的三种组成形式:1)单体酶:仅有一个活性部位的多肽链构成的酶,为数不多,且都是水解酶。2)寡聚酶:由若干相同或不同亚基结合而组成的酶,亚基一般无活性,必须相互结合后才有活性。3)多酶复合体:多种酶进行连续反应的体系。前一个反应产物为后一反应的底物。 第二章 提高酶产量采取的方法 1.条件控制:1)添加诱导物;2)降低阻遏物浓度 2.遗传控制:1)基因突变;2)体内基因重组3)体外基因重组 3.其他:1)添加表面活性剂;2)添加产酶促进剂 固定化细胞的定义 固定化细胞又称固定化活细胞或固定化增殖细胞,是指用各种方法固定在载体上又能进行生长、繁殖和新陈代谢的细胞 微生物发酵法用于酶的生产有哪些优点? 1.种类繁多,凡是动植物体内有的酶几乎都能从微生物中找到。 2.繁殖快,发酵周期短,培养简单,能通过控制培养条件大幅度提高酶的产量。 3.微生物具有较强的适应能力,可采用各种遗传变异手段培育出新的,更理想菌株。 植物细胞培养用于酶的生产,应对哪些工艺条件进行有效的控制? 1.培养基:需要大量的无机盐;需要多种维生素和植物激素;一般要求无机氮源;一般以蔗糖为碳源。 2.温度与pH值:温度一般控制在室温范围;pH值一般在微酸性范围。 3.通风与搅拌:供给溶解氧,还可使细胞分散;由于需氧量不多,而且对剪切力敏感,故不能太强烈。 4.光照的控制:根据细胞的特性及目标次级代谢物的种类不同,进行光照的调控;如欧芹细胞只有在光照条件下,才能形成类黄酮化合物。 5.前体的添加:可提高次级代谢物的产量; 6.刺激剂的应用:可强化次级代谢物的生物合成;常用:微生物细胞壁碎片和微生物胞外酶。 酶的剂型 1.液体酶制剂2.固体酶制剂3.纯酶制剂: 4.固定化酶制剂 第三章 酶分子改造的方法 1.化学修饰法(目前较多采用)2.变性诱导构象重建法3.基因定位突变法,即蛋白质工程 什么是酶分子的大分子结合修饰法?修饰后可达到哪些效果? 定义:利用水溶性大分子与酶结合,使酶的空间结构发生某些精细的改变,从而改变酶的特性与功能的方法。 1.提高酶活力2.增加酶的稳定性3.降低或消

文档评论(0)

挺进公司 + 关注
实名认证
文档贡献者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档