高考生物 第十单元 专题二十四 生物技术在其他方面的应用课件要点.ppt

专题二十四　生物技术在其他方面的应用 特定成分的提取与分离与PCR技术 1.特定成分的提取与分离 提取 物质 提取 方法 提取原理 步骤 DNA 法 在不同浓度的NaCl溶液中 不同;DNA不溶于酒精,但 溶于酒精 溶解在2 mol/L的NaCl溶液中→加蒸馏水稀释至0.14 mol/L的NaCl溶液使DNA析出，过滤→加入冷酒精析出 溶解度 蛋白质 盐析 血红蛋白 法、 法 根据 的大小；根据各种分子带电性质差异 样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定 玫瑰精油 法 利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来 水蒸气蒸馏→分离油层→除水过滤 橘皮精油 通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油 浸泡、漂洗→压榨、过滤、静置→再次过滤 胡萝卜素 使提取物溶解在 中，蒸发后得到提取物 粉碎、干燥→萃取、过滤→浓缩 凝胶色谱 电泳 水蒸气蒸馏 压榨法 萃取法 相对分子质量 有机 溶剂 石灰水 2.PCR技术 (1)PCR原理 DNA 原理，即： 热变性 (2)PCR反应过程 过程 说明 图解 变性 当温度上升到 以上时，双链DNA解聚为单链 复性 温度下降到 左右，两种引物通过 与两条单链DNA结合 延伸 72 ℃左右时， 有最大活性，可使DNA新链由5′端向3′端延伸 90 ℃ 50 ℃ 碱基互补配对 聚合酶 植物组织培养 1.植物组织培养的过程 脱分化 再分化 植物组织培养常用的培养基是 ，一般需要添加 和 两种植物激素。 2.菊花的组织培养过程 制备 (配制母液、配制培养基、灭菌)→ 消毒→接种→培养→ →栽培。 MS培养基 生长素 细胞分裂素 MS培养基 外 植体 移栽 3.月季的花药培养 (1)花粉发育经历了四分体时期、 期、双核期等阶段。 (2)花粉植株的产生途径 单核 胚状体 愈伤组织 (3)影响培养的因素：选择的材料、 的组成、亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种密度等。 (4)选材：要挑选完全 的花蕾，确定花粉发育时期最常用的方法是 法。某些植物的花粉细胞核不易着色,需采用 ,此法可将花粉细胞核染成 。 (5)实验操作：材料的选取→材料的消毒→ → 。 培养基 未开放 醋酸洋红 焙花青—铬矾法 蓝黑色 接种 培养 4.菊花茎组织培养与月季花药离体培养的比较 项目 菊花组织培养 月季花药离体培养 理论依据 植物细胞的 材料选取 未开花植株茎上部 的侧枝 的花蕾 光照状况 每日用日光灯照射12 h 开始 ，幼小植株形成后 操作流程 制备 培养某→外植体 →接种培养→移栽→栽培 选材→材料消毒→接种和培养→ →移栽→栽培、选育 影响因素 选材、营养、 、pH、 、光照等 基本过程 脱分化、再分化 全能性 新萌生 完全未开放 不需要光照 需要光照 MS 消毒 筛选和诱导 激素 温度 1.DNA粗提取与鉴定中不同试剂的用途及原理比较 DNA与蛋白质技术 试剂 浓度 用途 主要原理 NaCl溶液 2 mol/L 溶解DNA DNA在NaCl溶液中的溶解度随溶液浓度的变化而改变，在0.14 mol/L的NaCl溶液中DNA的溶解度最小 0.14mol/L 析出DNA 2 mol/L 鉴定时的溶剂 酒精 95%(体 积分数) 除去杂质以提纯DNA DNA不溶于酒精，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精 二苯胺 鉴定剂 DNA遇二苯胺(沸水浴)会变蓝色 柠檬 酸钠 0.03g/mL 抗凝剂 除去血液中的钙离子，防止血液凝固 2.血红蛋白的提取与分离 (1)血红蛋白的分离方法及相关原理 方法 原理 凝胶色谱法 根据相对分子质量的大小分离蛋白质 电泳法 根据各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同进行分离 (2)操作流程 3.细胞内DNA复制与体外DNA扩增（PCR技术）的比较 项目 细胞内DNA复制 PCR技术 不同点 解旋 在解旋酶的作用下，边解旋边复制 80～100 ℃高温解旋，双链完全分开 酶 DNA解旋酶、DNA聚合酶、DNA连接酶 TaqDNA聚合酶 引物 RNA 单链DNA片段或RNA 能量 ATP 不加 温度 体内温和条件 高温 不同点 子链合成 一条子链连续(先导链)，另一条子链不连续，先合成片段，再由DNA连接酶连接(滞后链) 两