2.2.2单克隆抗体讲解.pptVIP

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2.2.2 动物细胞融合和单克隆抗体 二、单克隆抗体 二、单克隆抗体 3.一种抗原侵入机体之后,引起机体免疫反应产生的抗体只有一种吗? 动物在免疫反应过程中,体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上。 4.一个B淋巴细胞能分泌多种抗体吗? 每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。 二、单克隆抗体 二、单克隆抗体 3、应用 【例4】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是( ) A.经过免疫的B淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 B.不经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋巴细胞 【例5】单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的 (  ) B淋巴细胞   B.T淋巴细胞 C.骨髓瘤细胞 D.杂交瘤细胞 【例6】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体,下列实验步骤中错误的是( ) A.将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B淋巴细胞 B.用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 C.用聚乙二醇作诱导剂,促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D.筛选杂交细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体 * * 1.什么叫做抗体? 能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。 2.抗体是由何种细胞产生的? 效应B细胞(浆细胞)即B淋巴细胞 传统生产抗体的方法: 抗原 反复注射动物 从动物的血清中分离抗体 该法制备抗体的缺点: 产量低、纯度低、特异性差、灵敏度低 单克隆抗体! 单: 克隆: 抗体: 单个杂交瘤细胞 无性繁殖 化学性质单一,特异性强 由单一杂交瘤细胞经过无性繁殖形成的细胞群产生的化学性质单一,特异性强的抗体,即单克隆抗体。 二、单克隆抗体 1、概念 在体外培养的条件下,一个B淋巴细胞能无限增殖形成细胞群吗? 不能 什么样的细胞能够在体外无限增殖呢? ——肿瘤细胞! 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 杂交瘤细胞 动物细胞培养 设计方案: 动物细胞融合 单克隆抗体 既能产生特异性抗体, 又能大量增殖的细胞 1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验 单克隆抗体 筛选 多种类型的细胞 杂交瘤细胞 体外或体内 细胞培养 筛选 骨髓瘤 细胞 诱导细胞融合 特异性杂交瘤细胞 杂交瘤细胞群 提取 经过免疫的 B淋巴细胞 动物细胞融合技术 动物细胞培养技术 单克隆抗体的制备过程: 特点:既能产生专一抗体又能大量繁殖 特点:特异性强灵敏度高可大量制备 给小鼠注射抗原 免疫 ①为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白? ② 有几种融合方式? ③ 杂交瘤细胞是如何筛选出来的?有何特点? ④筛选出的杂交瘤细胞产生的抗体都一样吗? ⑤ 如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体? 2、过程 BB 、B瘤 、瘤瘤 (B、瘤) (筛选一)选择性培养基:筛选出杂交瘤细胞 获得产生相应抗体的B淋巴细胞 (筛选二):选出能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞 √ 体外培养 小鼠腹腔内培养 杂交瘤细胞特点:既能产生特异性抗体,又能大量增殖。 2、单克隆抗体过程中进行了几次筛选?目的分别是什么? 第一次筛选出杂交瘤细胞;第二次筛选出能产生所需特异性抗体的杂交瘤细胞 3、本过程利用了哪些技术? 动物细胞融合、动物细胞培养 单抗制备过程分哪几步?请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是? 1、诊断试剂——最广泛应用 准确、高效、简易、快速 单克隆抗体最主要的优点:特异性强,灵敏度高,并能大量制备。 “生物导弹” =单克隆抗体+药物 单抗导向,药物为弹头 2、治疗疾病和运载药物 主要用于癌症治疗,单克隆抗体作为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹”,准确杀伤癌变细胞。 特点:疗效高,毒副作用小 A D B 两个过程 动物细胞培养过程 单克隆抗体制备过程 三个“一” 一个诱导细胞融合的新方法 --灭活病毒 一个新细胞--杂交瘤细胞 一个优势--单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势 (1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞是取自小鼠体内的 细胞,从小鼠体内提取分离该细胞之前,应给小鼠注射_____________类物质。 (2)d过程是一个_____________过程,该过程的进行常用_____________或_____________的诱导。 (3)假设仅考虑某两个细胞的融合,则可形成 种类型的C

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