核酸的生物合成讲解.ppt

噬菌体Q?的合成 A. 负链的合成 B. 正链的合成 病毒的正链 复制中间体 复制中间体 新合成的正链 新合成的负链 负链 2、RNA的复制 正链病毒 负链病毒 3、 核酸合成的抑制剂 ? 核苷酸合成抑制剂 氨基酸类似物 叶酸类似物 碱基和核苷酸类似物 嵌合剂 烷化剂 ? 与DNA模板结合的抑制剂 ? 作用于DNA聚合酶或RNA集合酶的抑制剂 抗菌素:如利福平、曲张霉素 有机化合物：如磷羧基乙酸 4、 基因工程及分子生物学 技术简介 基因工程 体细胞克隆技术 聚合酶键式反应（polymerase chain reaction, PCR） * 基因工程简介 基因工程亦称遗传工程，即利用DNA重组技术的方法，把DNA作为组件，在细胞外将一种外源DNA（目的基因）和载体DNA重新组合连接（重组），最后将重组体转入宿主细胞，使外源基因DNA在宿主细胞中，随细胞的繁殖而增殖（cloning，克隆），或最后得到表达，最终获得基因表达产物或改变生物原有的遗传性状。 基因工程的操作技术 基因工程的应用与前景 基因工程的操作技术 Foreign DNA to be inserted Plansmid vector Joining Recombinant DNA molecule Introduction into host cells by transformation of viral infection Host chromateme Slection for cells coteining a recombinant DNA molecule Cloning + 1、体外基因重组 ? 目的基因的制备? 载体的构建：质粒或噬菌体 ? 目的基因与载体重组 2、重组体DNA的转化增殖和表达 ? 转化 ? 筛选? 增殖和基因表达 大白鼠的生长激素基因插入到一个质粒中去，在金属巯基蛋白启动子旁边，这个启动子被金属镉所活化 PCR技术原理示意图 靶序列 变性和引物复性 循环1 循环2 循环3 变性和引物复性 链延伸 Tag酶 链延伸 PCR(聚合酶链式反应)：是DNA聚合酶在体外扩增DNA片断的技术，经历DNA变性、退火、聚合酶催化DNA链的延伸等三个步骤周而复始的过程。 基因工程的应用和前景 ? 建立基因文库。基因文库的建立有利于研究基因结构、基因表达调控机制、个体发育和繁殖的机理、疾病发病机制等，最终将导致遗传育种、疾病基因治疗发生革命性进步。 ? 生产某些珍贵的生化药物，如干扰素、胰岛素、生长激素等。 ? 改造生物原有性状，培育出人类需要的新物种。 克隆羊多利的诞生 胚胎羊 乳腺上皮细胞（提供DNA） 母羊 除去细胞核的卵母细胞（受体） 体外融合 植入受体母羊 问答题 1、比较DNA复制与RNA转录的异同。 2、比较DNA聚合酶与RNA聚合酶催化作用的异同。 3、DNA复制的高度准确性是通过什么来实现的？ 名词解释 中心法则　 半保留复制　 转录　 反转录　　有义链　反义链　　内含子　　外显子　 冈崎片段 DNA的损伤和切除修复 碱基丢失 碱基缺陷或错配 结构缺陷 切开 核酸内切酶 核酸外切酶 切除 DNA聚合酶 DNA连接酶 AP核酸内切酶 核酸外切酶 切开 切除 修复 连接 糖苷酶 插入酶 碱基取代 DNA的重组修复 胸腺嘧啶二聚体 复制 核酸酶及重组蛋白 修复复制 DNA聚合酶 DNA连接酶 重组 （四）SOS修复 当DNA损伤广泛难以继续复制时，由此而诱发出一系列复杂的反应。 在E. coli，各种与修复有关的基因，组成一个称为调节子(regulon)的网络式调控系统。 这种修复特异性低，对碱基的识别、选择能力差。通过SOS修复，复制如能继续，细胞是可存活的。然而DNA保留的错误较多，导致较广泛、长期的突变。 二、 RNA的生物合成 DNA指导下RNA的合成（转录） RNA指导下RNA的合成 (RNA的复制——了解) RNA和DNA合成比较 1、DNA指导下RNA的合成（转录） 概念及DNA的有义链和反义链 RNA聚合酶及催化反应 RNA合成过程（以原核为主） RN