PCR污染的产生及防治资料讲解.pptVIP

PCR污染的产生及防治 PCR实验室污染的特点 概念：由于各种原因，造成的PCR 扩增体系中出现了非目的检测样本本身的模板，使得PCR结果出现假阳性。 PCR实验室的污染不同于一般生物安全实验室的污染 PCR污染总是产生假阳性结果 PCR流程 样品准备（sample preparation） 反应体系配置（PCR reaction assembly） PCR反应（PCR execution） 反应后分析（post-PCR analysis） PCR污染的途径 操作错误或者误差造成的样品间交差污染 PCR试剂的污染 PCR实验器材的污染 气溶胶（Amplicon Aerosol） PCR污染的四种来源 标本或模板间的交叉污染 PCR试剂的污染 PCR扩增产物的污染 实验室克隆质粒的污染 引起PCR污染的原因 标本或模板间交叉污染 容器被污染 标本或模板放置时, 由于密封不严溢于容器外 容器外粘有模板而造成相互间交叉污染 标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染 模板吸取过程中, 因气溶胶（aerosol）或其他原因引起移液器污染，从而导致交叉污染 有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染 引起PCR污染的原因 PCR试剂污染 PCR 试剂配制过程中, 移液器、容器、水及其他溶液等原因造成试剂被P