Pseudomonassp.F-12发酵优化及其转化合成半胱氨酸研析.pdfVIP

生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第 期 2014 10 sp F-12 发酵优化及转化合成半胱氨酸的 Pseudomonas . 研究 赵婧楠  李志敏  叶勤 （华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237） 2 摘 要 ： 通过不同发酵策略对Pseudomonas sp. F-12 以DL-2-氨基- △ -噻唑啉-4-羧酸 （DL-ATC）为底物生产L-半胱氨酸的 过程进行优化，以分批发酵和指数流加发酵的形式进行生产，将发酵过程中的DL-ATC 浓度分别控制在5 g/L 和15 g/L。结果表明 15 g/L DL-ATC 分批发酵生产L-半胱氨酸得到最高酶活为149.1 U/mL，比活为70.9 U/mg DCW ；采用15 g/L DL-ATC 两阶段指数流 加发酵，可使最高酶活达到313.3 U/mL，提高为分批发酵的2.1 倍。同时在两阶段发酵过程中，能减少DL-ATC 用量为5 g/L。 两 阶段发酵过程采用不同流加策略，证明菌体得率对酶活水平有显著影响。首次考察了Pseudomonas sp. F-12 全静息细胞转化合成L- 半胱氨酸的主要影响因素。结果表明Pseudomonas sp. F-12 的最适转化pH 为8.0，最适转化温度为30℃。加入甲苯等有机溶剂改变 细胞膜通透性，使得半胱氨酸产量比对照组提高7.16 倍，最高摩尔转化率达到93.3 %。不同金属离子对转化影响不同，0.1 mmol/ 2+ 2+ 2+ 2+ L Fe 对转化反应有促进作用，0.1 mmol/L Co 、Zn 、Ni 等重金属离子有抑制作用。研究结果为微生物法发酵及全细胞转化合成 半胱氨酸的后续工业化奠定了基础。 关键词 ： 假单胞菌 L-半胱氨酸 DL-2-氨基- △ 2-噻唑啉-4-羧酸 （DL-ATC） 发酵 生物转化 - Study on Fermentation and Conversion of L cysteine by - Pseudomonas sp. F 12 Zhao Jingnan Li Zhimin Ye Qin （State Key Laboratory of Bioreactor Engineering ，East China University of Science and Technology ，Shanghai 200237 ） Abstract: L-cysteine has been widely applied in food and pharmaceuticals. In this study, different fermentation strategies of Pseudomonas sp. F-12 transforming