四种鲟鱼线粒体PCR-RFLP鉴定方法研析.pdfVIP

生物技术通报 ·技术与方法· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第 期 2014 12 四种鲟鱼线粒体 PCR-RFLP 鉴定方法的研究 1，2 2 3 1，2 2 2 董传举   刘园园  刘晓勇  宋迎楠   徐鹏  孙效文 （1. 上海海洋大学水产与生命学院，上海 201306 ；2. 中国水产科学研究院水产应用基因组中心，北京 100141 ； 3. 中国水产科学研究院鲟鱼国家级良种场，北京 100070） 摘 要 ： 利用线粒体序列开发高效准确的分子鉴定方法广泛应用于水产品易混物种的鉴定中。应用PCR-RFLP 技术，对鲟 鱼易混种开展了分子生物学鉴定方法研究。结果表明，利用一组引物对8 种鲟鱼线粒体基因进行PCR 扩增，分别应用限制性内切 酶 α I、 II 和 I-HF、 I 对扩增产物进行酶切，并用3.0% 的琼脂糖凝胶检测PCR 产物的酶切结果，可从8 种鲟鱼易 Taq Ava Eag Nae 混种中分别鉴别出中华鲟、小体鲟、达氏鳇以及欧鳇。所建立的方法操作简单，在保证鱼种存活基础上只需剪取少量鳍条，便可 快速准确地进行常见鲟鱼和不同鲟鱼产品的鉴别，大大增加了鉴定结果的准确性和可信度，极大地提高了工作效率。 关键词 ： 鲟鱼 线粒体DNA PCR-RFLP 鉴定方法 分子标记 DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2014.12.013 - PCR RFLP Analysis of mtDNA to Identify Four Kinds of Sturgeons 1，2 2 3 1，2 2 2 Dong Chuanju Liu Yuanyuan Liu Xiaoyong Song Yingnan Xu Peng Sun Xiaowen （1. College of Fisheries and Life Science ，Shanghai Ocean University ，Shanghai 201306 ；2. Centre for Applied Aquatic Genomics ，Chinese Academy of Fishery Sciences ，Beijing 100141 ；3. National Sturgeon Hatchery ，Chinese Academy of Fishery Sciences ，Beijing 100070 ） Abstract: With the high efficient and accurate, molecular identification methods are widely used in some easily confused species. So we carried out the research in some miscible species of sturgeons with the application of PCR-RFLP. With the help of one pair primers, we amplified one region of mtDNA in 8 kinds of sturgeons’ which conta