日本鳗鲡I型Cathelicidin基因的克隆及原核表达.pdfVIP

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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2015, 31 7 :124-131 日本鳗鲡I 型 Cathelicidin 基因的克隆与原核表达 1 2 张东玲  喻达辉 (1. 集美大学水产学院 鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心,厦门 361021 ;2. 中国水产科学研究院南海水产研究所,广州 510300) 摘 要 : Cathelicidin 是目前发现的一个最大抗菌肽家族,具有多重生物学功能。 旨在探索和利用鱼类Cathelicidin 抗菌机制 和潜在的生物学功能。应用RACE-PCR 技术获得日本鳗鲡I 型Cathelicidin( )基因的cDNA 全长序列。 的cDNA 全 AjCathI AjCathI 长为842 bp,开放阅读框为570 bp,编码189 个氨基酸。氨基酸序列分析表明,AjCathI 靠近C 端有4 个保守的半胱氨酸序列,抗 菌成熟肽与香鱼 ( )抗菌成熟肽相似性最高,同源性为65.57%。进化分析表明,AjCathI 与其它鱼类亲缘关系较 Plecoglossus altivelis 近,处于同一个分支上。将AjCathI 基因克隆至pET-28a 载体,转化Escherichia coli BL21(DE3) 宿主菌进行表达。结果表明, 鎳 AjCathI 以包涵体形式表达,经 柱纯化、Western blot 验证和透析复性,获得高纯度的重组蛋白。 关键词 : 日本鳗鲡;Cathelicidin ;抗菌肽 ;RACE-PCR DOI :10.13560/ki.biotech.bull.1985.2015.07.018 Cloning and Prokaryotic Expression of Cathelicidin Gene from , Japanese Eel I Anguilla japonica 1 2 Zhang Dongling Yu Dahui (1. Fisheries College ,Jimei University ,Engineer Research Center of Eel Modern Industry Technology ,Ministry of Education ,Xiamen 361021 ; 2. South China Sea Fisheries Research Institute ,Chinese Academy of Fishery Sciences ,Guangzhou 510300 ) Abstract: Cathelicidin, an utmost family of antibacterial peptide so far, possesse

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